Induzindo isquemia via oclusão do cérebro médio e da artéria carótida comum em um modelo de rato

Comece com um rato contido e anestesiado com uma artéria carótida comum direita frouxamente suturada, ou CCA, na região do pescoço.

Este CCA se ramifica na artéria cerebral média, ou MCA, fornecendo sangue oxigenado ao cérebro.

Reposicione o rato lateralmente e faça uma incisão entre o olho direito e a orelha.

Retraia a pele e disseque o músculo para expor o crânio. Posicione um gotejador de solução salina e um aspirador para lavar.

Perfure o crânio e remova a aba óssea. Em seguida, corte a camada protetora para expor o MCA.

Usando uma pinça de diatermia, aplique calor para coagular a ACM direita em vários pontos e, em seguida, corte-a no ponto de cruzamento da veia.

A coagulação causa oclusão arterial, reduzindo o fluxo sanguíneo oxigenado para o cérebro, induz isquemia e leva à morte neuronal.

Cubra o cérebro exposto.

Exponha novamente o pescoço e, em seguida, ligue firmemente o CCA direito. Isso impede o fluxo sanguíneo permanente para a ACM e intensifica a isquemia.

Incisar a pele no ponto médio entre a órbita direita e o canal auditivo externo. Em seguida, disseque o músculo temporal para revelar o crânio. Em seguida, usando até cinco afastadores elásticos de 3 milímetros, retraia e prenda a pele na placa de cortiça. Em seguida, coloque um gotejamento salino acionado por gravidade ajustado à roda do polegar acima do local aberto no ponto mais alto do crânio perto da orelha e configure um sistema de aspiração com um bico no ponto mais baixo para remover quaisquer detritos ósseos e limpar qualquer sangramento menor do local exposto.

Ajuste a roda para visualizar a fonte de sangramento, conforme necessário. Agora, use uma broca odontológica com uma broca grossa revestida de diamante de 1,6 milímetro a aproximadamente 8.000 RPM para realizar uma craniotomia de 5 milímetros por 5 milímetros na região exposta, tomando cuidado para aplicar pressão circular e lateral, mas não para baixo, durante a perfuração. Quando ficar completamente transparente, use uma pinça para remover o osso. Em seguida, usando um gancho dural caseiro, abra cuidadosamente a dura-máter, tomando cuidado para evitar romper os grandes vasos sanguíneos superficiais.

Em seguida, use uma pinça de diatermia de joalheiro angular com pontas pontiagudas de 0,25 milímetro para coagular a ACM de onde a veia cerebral inferior cruza até o ponto de bifurcação da artéria e depois ao longo do ramo caudal da ACM, até que os vasos estejam totalmente ocluídos. Em seguida, para confirmar que a oclusão está completa, use uma tesoura microvascular para cortar a seção da ACM ocluída que fica abaixo de onde a veia cerebral inferior cruza a ACM. Agora, cubra a área exposta com uma gaze embebida em solução salina e retorne o rato à posição supina. Reabra a sutura frouxamente amarrada no pescoço para reexpor as artérias carótidas e dê um nó na sutura ao redor da artéria do mesmo lado da ACM ocluída para ligar permanentemente o vaso.