Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 3:14 min. • July 8th, 2025
As regiões do locus coeruleus, localizadas bilateralmente no tronco cerebral do camundongo, contêm neurônios produtores de norepinefrina e regulam várias regiões do cérebro.
Para detectar essas regiões do locus coeruleus, comece com uma lâmina de vidro carregando as seções fixas e criopreservadas do tronco cerebral do camundongo.
Lave a lâmina com um tampão para remover vestígios de fixação.
Adicione um tampão contendo detergente e incube para permeabilizar as membranas e, em seguida, lave.
Introduzir anticorpos primários específicos para a enzima dopamina β-hidroxilase, que converte a dopamina em norepinefrina, um neurotransmissor.
Incubar para permitir que os anticorpos interajam com a dopamina β-hidroxilase.
Lave para remover anticorpos não ligados.
Em seguida, adicione anticorpos secundários acoplados a fluoróforos verdes e incube no escuro.
Os anticorpos secundários se ligam aos anticorpos primários e depois são lavados.
Adicione o meio de montagem às seções do cérebro, cubra e seque.
Observe as lâminas sob um microscópio de fluorescência.
A fluorescência verde que representa os neurônios produtores de norepinefrina marcados nas seções cerebrais indica a presença de regiões lo
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