Um método para infligir traumatismo cranioencefálico fechado na cabeça em Drosophila

Tome moscas adultas anestesiadas Drosophila em um frasco vazio.

Insira uma bola de algodão no frasco para confinar as moscas no fundo, garantindo um impacto mais forte ao infligir ferimentos.

Assim que as moscas se recuperarem da anestesia, conecte o frasco à mola do dispositivo de trauma de alto impacto.

Coloque a extremidade do frasco para injetáveis numa plataforma elevada. Em seguida, puxe a mola para trás em um ângulo e solte-a.

O frasco atinge a plataforma, fazendo com que as moscas colidam contra as paredes do frasco repetidamente.

O cérebro da drosófila ataca a cápsula da cabeça, imitando a lesão cerebral traumática da cabeça fechada, ou TCE, sem causar danos externos.

Deixe as moscas se recuperarem e transfira-as para um frasco com comida.

A lesão causa danos às membranas dos neurônios, prejudicando a função neuronal.

As moléculas de sinalização dos neurônios danificados recrutam células imunológicas, levando à degradação progressiva do tecido cerebral, resultando na morte das moscas.

Coloque entre 1 e 60 moscas anestesiadas com dióxido de carbono em um frasco vazio e tampe o frasco usando uma bola de algodão bem ajustada. Em seguida, desenhe uma linha no frasco, a 1 polegada de sua base. Derrube as moscas das laterais do frasco e empurre a bola de algodão até que ela corresponda à linha recém-desenhada.

Aguarde cinco minutos para que as moscas recuperem a mobilidade do dióxido de carbono. Em seguida, insira a extremidade da mola no frasco para injetáveis até que a borda interna do Velcro esteja nivelada com a parte superior do frasco. Isso prende o frasco à mola, criando um encaixe de compressão apertado. Com a mola plana, certifique-se de que 1 polegada do frasco se sobreponha à região elevada da tampa do balde de gelo.

Neste momento, coloque proteção auditiva porque o impacto do frasco contra a tampa do balde de gelo produz um ruído alto. Em seguida, segure o frasco para injetáveis na região do Velcro usando o polegar e o indicador da mão esquerda. Com a mão direita, segure a tábua firmemente no tampo da bancada.

Em seguida, puxe a mola perfeitamente reta de volta ao ângulo desejado e, em seguida, solte a mola. Aguarde até que a mola pare completamente e, em seguida, remova o frasco da mola. Coloque o frasco sobre a bancada e deixe as moscas recuperarem durante pelo menos cinco minutos. Durante esse tempo, as moscas recuperarão lentamente seu movimento normal. Em seguida, transfira as moscas para um frasco com comida para moscas para análise posterior.