Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 2:29 min. • July 8th, 2025
Pegue um camundongo anestesiado implantado com uma cânula guia em seu cérebro.
Uma sonda fictícia dentro da cânula impede a entrada de detritos teciduais.
Coloque uma coleira em volta do pescoço do rato.
Substitua a sonda fictícia por uma sonda de microdiálise contendo uma membrana semipermeável especializada, que permite o fluxo de moléculas com alto peso molecular.
A sonda é conectada a bombas através de portas de entrada e saída para regular o fluxo de um tampão fisiológico.
Prenda o rato dentro de uma gaiola usando a coleira, deixe-o se recuperar e inicie o fluxo.
O tampão entra no tecido cerebral através da entrada e se mistura com o fluido intersticial, ou ISF, no espaço extracelular, que contém proteínas envolvidas na comunicação celular.
Os componentes se difundem através da membrana e são coletados através da saída em frações.
O ISF coletado, contendo proteínas extracelulares, está pronto para análise.
Coloque o colar ao redor do pescoço do animal implantado com cânula guia anestesiada e remova a porca e a sonda fictícia. Insira lentamente a sonda de microdiálise através da cânula guia e aperte a porca de capa.
Em seguida, coloque o mouse em uma gaiola conectada a um sistema de movimento livre e amarre o mouse com a coleira. Após pelo menos uma hora, pare sequencialmente a bomba de rolos e a bomba de seringa, reiniciando as bombas com a bomba de seringa ajustada para 20% mais rápido que a bomba de rolos, e coloque a extremidade livre da tubulação de saída em um coletor de frações refrigerado para coletar o ISF cerebral. Quando o volume experimental apropriado for obtido, remova a sonda e manuseie a recuperação do mouse conforme demonstrado.