Microdiálise de fluido intersticial de um cérebro de camundongo para isolar proteínas extracelulares

Pegue um camundongo anestesiado implantado com uma cânula guia em seu cérebro.

Uma sonda fictícia dentro da cânula impede a entrada de detritos teciduais.

Coloque uma coleira em volta do pescoço do rato.

Substitua a sonda fictícia por uma sonda de microdiálise contendo uma membrana semipermeável especializada, que permite o fluxo de moléculas com alto peso molecular.

A sonda é conectada a bombas através de portas de entrada e saída para regular o fluxo de um tampão fisiológico.

Prenda o rato dentro de uma gaiola usando a coleira, deixe-o se recuperar e inicie o fluxo.

O tampão entra no tecido cerebral através da entrada e se mistura com o fluido intersticial, ou ISF, no espaço extracelular, que contém proteínas envolvidas na comunicação celular.

Os componentes se difundem através da membrana e são coletados através da saída em frações.

O ISF coletado, contendo proteínas extracelulares, está pronto para análise.

Coloque o colar ao redor do pescoço do animal implantado com cânula guia anestesiada e remova a porca e a sonda fictícia. Insira lentamente a sonda de microdiálise através da cânula guia e aperte a porca de capa.

Em seguida, coloque o mouse em uma gaiola conectada a um siste