Modelo de invasão tumoral baseado em matriz usando co-cultura de glioblastoma de microglia

Comece adicionando uma suspensão fria de glioblastoma e células microgliais, cada uma corada com um corante fluorescente distinto, em uma solução de matriz de polímero frio.

A condição fria impede a polimerização prematura da matriz.

Em seguida, transfira a mistura para uma inserção de câmara porosa dentro de uma placa de cultura.

Incubar para permitir a polimerização da matriz, formando um gel que incorpora as células.

Adicione meios sem soro ao inserto e meios de crescimento contendo soro ao poço abaixo e, em seguida, incube.

Os fatores químicos no soro promovem a migração celular em direção ao meio rico em soro.

Além disso, a microglia secreta moléculas de sinalização que interagem com as células do glioblastoma.

Isso aumenta a migração das células de glioblastoma para a parte inferior da inserção porosa, assemelhando-se à migração de um tumor para o tecido circundante.

Remova as células do topo da câmara.

Agora, fixe as células restantes com um fixador e lave-as com tampão. A fluorescência distinta das células ajuda a rastrear a migração celular.

Descongele a mistura de matrizes a quatro graus Celsius durante a noite. Em seguida, preparar uma concentração de 10 mg/ml de matriz