Avaliação do comprometimento motor em modelos de C. elegans usando o ensaio de locomoção radial

Pegue placas de Petri contendo uma distribuição uniforme de comida de minhoca em meios de crescimento de nematóides.

Vire cada prato e marque o centro.

Usando um microscópio, introduza os vermes Caenorhabditis elegans no local marcado centralmente.

Em seguida, introduza minhocas com a mesma idade nas placas restantes.

Esses vermes expressam as formas selvagens ou mutantes de uma proteína de ligação ao RNA humano, que forma agregados tóxicos no citoplasma neuronal e leva à morte neuronal.

Isso reduz a capacidade dos vermes de controlar os movimentos musculares, resultando em função motora prejudicada.

Permita que os vermes rastejem por um determinado período.

Usando um microscópio, marque a localização final de cada verme.

Meça a distância radial percorrida pelos vermes desde o ponto central até suas posições finais.

Em comparação com os controles, os vermes que expressam níveis mais baixos da proteína do tipo selvagem apresentam comprometimento motor leve, aqueles com níveis mais altos da proteína do tipo selvagem apresentam comprometimento moderado e aqueles com a proteína mutante apresentam comprometimento grave.

Vire as placas de ensaio NGM de cabeça para baixo e rotule a parte