Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 2:42 min. • July 8th, 2025
Comece com um mouse anestesiado e seguro.
Remova os pelos do pescoço do camundongo e desinfete o local da cirurgia.
Faça uma incisão no pescoço e retraia o músculo subjacente e a traqueia para expor a artéria carótida comum direita.
A artéria carótida fornece o sangue oxigenado ao cérebro.
Amarre dois nós ao redor da artéria para restringir o fluxo sanguíneo ascendente.
Suture a incisão e transfira o camundongo para uma câmara de baixo oxigênio. Insira uma sonda retal para monitorar a temperatura corporal e, em seguida, ajuste a lâmpada de calor para manter a temperatura apropriada.
O baixo oxigênio na câmara reduz os níveis de oxigênio no sangue do camundongo, criando uma condição de hipóxia.
Com a artéria carótida suturada, o suprimento de sangue e oxigênio para o cérebro é reduzido ainda mais. Isso leva à isquemia, que causa danos neuronais.
Gradualmente, os componentes sanguíneos aderem à parede do vaso, formando um coágulo ou trombo.
Isso obstrui o fluxo sanguíneo, aumentando o dano neuronal e induzindo um acidente vascular cerebral trombótico.
Coloque um camundongo C57 preto preto de 10 a 13 semanas e 22 a 30 gramas na cama cirúrgica. Depois de confirmar a anestesia beliscando o dedo do pé, aplique pomada nos olhos do animal. Estique os quatro membros ao longo do rolo de pescoço e prenda-os com fita adesiva.
Em seguida, usando um creme depilatório, remova os pelos do pescoço do animal e limpe o local da cirurgia. Agora mova o leito cirúrgico sob um microscópio de dissecação e faça uma incisão cervical direita de 0,5 centímetro na pele ao longo da linha média. Usando uma pinça fina, separe a traqueia e o músculo para expor a artéria carótida comum direita e coloque duas suturas de seda 5-0 pré-cortadas sob a artéria. Tenha cuidado para separar a artéria carótida do nervo vago.
Nó vivo para suturas de seda 5-0 liberáveis pré-cortadas no RCCA. Em seguida, use suturas de monofilamento de náilon 4-0 para fechar a pele e transfira rapidamente o mouse para o sistema de hipóxia.
Coloque a máscara facial sobre o nariz e a boca do animal e uma sonda retal, de modo que uma temperatura corporal de 37,5 graus Celsius seja mantida durante todo o parto da hipóxia. Ajuste o calor lamps.