Processamento de um cérebro de camundongo para análise a jusante

Pegue um cérebro de camundongo recém-colhido e congele-o rapidamente em isopentano pré-resfriado para rápida preservação do tecido.

Em seguida, transfira o cérebro, com o córtex voltado para cima, para uma matriz cerebral congelada para manter um ambiente frio durante o corte.

Permita que o cérebro se equilibre com a temperatura da matriz. Alinhe-o na matriz ao longo dos seios sagital e transverso para garantir seções simétricas.

Insira lâminas geladas no cérebro, garantindo o alinhamento adequado.

Em seguida, pressione-os uniformemente para obter seções cerebrais uniformes.

Remova as lâminas com as seções e posicione-as, com o lado rostral para cima, sobre uma placa de vidro congelada.

Organize os cortes da orientação rostral para caudal na ordem anatômica correta. Agora, separe-os.

Usando uma referência cerebral adequada, localize e retire a região de interesse da seção.

Transferir o tecido excisado para um frasco pré-refrigerado para análise a jusante.

Depois de remover cérebros de camundongos adultos do tipo selvagem CD-1 sacrificados, congelam rapidamente o tecido por 60 segundos em nitrogênio líquido ou isopentano pré-resfriado com gelo seco e o armazenam a -80 graus Celsius.