Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 3:55 min. • July 8th, 2025
Descongele uma seção de tecido cerebral de rato congelado.
Adicione tampão e pique o tecido. Em seguida, transfira-o para um tubo contendo tampão e misture.
Centrifugue a mistura e descarte o sobrenadante.
Adicione uma solução enzimática proteolítica ao tecido e ressuspenda-o usando uma pipeta de grande diâmetro.
Incube a mistura para quebrar a matriz extracelular, afrouxando as células neurais.
Centrifugue a mistura e descarte o sobrenadante.
Ressuspenda os fragmentos de tecido em um tampão resfriado e pipete-os repetidamente para dissociar as células.
Deixe os detritos e as células não dissociadas assentarem e, em seguida, transfira a suspensão de célula única para um novo tubo.
Transfira as células para etanol gelado e misture. Incube-os para fixar e permeabilizar as células.
Centrifugar a suspensão e rejeitar o sobrenadante.
Ressuspenda as células neurais em um tampão frio para análise posterior.
Para picar o tecido, deixe as amostras descongelarem em uma placa de vidro frio por não mais de 1 minuto antes de cobrir as amostras com uma a duas gotas de solução tampão A. Em seguida, segurando uma lâmina de barbear completamente vertical à placa, pique o tecido 100 vezes em cada di
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