Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 5:13 min. • April 28th, 2025
Pegue uma mosca de olhos brancos, anestesiada, transgênica e adaptada ao escuro.
A mosca expressa canais iônicos TRPL marcados com eGFP nos fotorreceptores do olho.
No escuro, o TRPL localiza-se nas membranas dos rabdômeros - as microvilosidades dos fotorreceptores.
Usando ar comprimido, empurre a mosca de cabeça para dentro de uma ponta de pipeta.
Apare a ponta e empurre a braguilha para trás.
Apare novamente e empurre a mosca para frente até que apenas sua cabeça se projete.
Imobilize a ponta em massa de modelar aderida a uma lâmina e coloque-a em uma platina de microscópio de fluorescência, com o olho voltado para a objetiva do microscópio radialmente.
Adicione uma gota de água à objetiva e abaixe-a até tocar o olho.
Capture imagens dos fotorreceptores.
Meça as intensidades de fluorescência nos rabdômeros, corpo celular e fundo.
Ilumine a mosca com luz laranja para induzir a translocação de TRPL para o corpo celular.
Repita as medições de imagem e fluorescência.
Compare as imagens para observar a fluorescência rabdomeral reduzida pós-iluminação, indicando translocação TRPL para o corpo celular.
Para preparar uma mosca em uma variação não letal, transfira a mosca anestesiada com gelo de ca
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