Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 3:01 min. • April 28th, 2025
<
p style='background-color:#ffffff;line-height:1.38;margin-bottom:0pt;margin-top:0pt;padding:0pt 0pt 12pt;text-align:justify;' dir='ltr'>Comece com uma placa de fundo plano com vários poços revestida com uma matriz de membrana basal, que contém polímero extracelular e proteínas de adesão que imitam a matriz do microambiente tumoral.Introduza uma mídia contendo uma neuroesfera de células de glioma derivadas de um tumor cerebral pediátrico, garantindo que ela esteja posicionada centralmente no poço.
A matriz promove a ligação da neuroesfera ao poço.
Adicione um reagente supressor de fundo para minimizar a fluorescência não específica.
Em seguida, introduza anticorpos anti-CD44 conjugados com fluoróforo verde.
Transfira a placa para um sistema de imagem de células vivas alojado dentro de uma incubadora que mantém as condições fisiológicas da célula.
Com o tempo, as células de glioma expressam a proteína de adesão celular CD44, que interage com as proteínas de adesão.
Isso ativa a via de sinalização celular e facilita a migração celular da neuroesfera.
Os anticorpos anti-CD44 conjugados com fluoróforo ligam-se ao CD44 expresso nas células do glioma, tornando-as fluorescentes.
O aparecimento de
Veja a transcrição completa e aceda a milhares de vídeos científicos