Desenvolvendo um modelo de pressão translaminar usando um sistema autônomo translaminar

Comece com um olho humano. Remova a bainha para expor o nervo óptico.

Dividir o olho e remover o humor vítreo do segmento posterior.

Apare a esclera, a camada externa, e espalhe a retina contendo as células ganglionares da retina conectadas ao nervo óptico através da lâmina crivosa, uma estrutura semelhante a uma malha.

Coloque este segmento sobre a cúpula da câmara inferior do sistema autônomo translaminar, com o nervo óptico voltado para cima e sele-o.

Conecte a tubulação e flua um meio de perfusão.

O movimento do líquido aumenta a pressão dentro da ocular, assemelhando-se à pressão intraocular.

Em seguida, posicione a câmara superior que cobre o nervo óptico e sele-a.

Conecte a tubulação para fluir o meio ao redor do nervo, assemelhando-se à pressão intracraniana.

A diferença de pressão entre essas câmaras estabelece uma pressão translaminar através da lâmina crivosa, permitindo o estudo da transmissão do sinal das células ganglionares da retina para o nervo óptico sob essa condição de pressão.

Para preparar uma amostra do globo ocular inteiro humano, remova a bainha do nervo óptico e remova o humor vítreo do segmento posterior. Para garantir um bom ajuste na cúpula redonda da câmara IOP, apare esclera adicional do segmento posterior conforme necessário e use uma pinça para garantir que a retina esteja espalhada uniformemente sobre a parte posterior humana do segmento. Em seguida, coloque o segmento na câmara IOP do TAS sobre a cúpula redonda, com o nervo óptico voltado para cima, e use um O-ring de resina epóxi e 4 parafusos para selar o segmento posterior.

Para configurar a câmara IOP, insira a tubulação nas portas de entrada e saída da câmara e insira a seringa de entrada IOP na porta de entrada. Insira a configuração da seringa de saída de PIO vazia na porta de saída e use o método push-pull para infundir lentamente o meio de perfusão na porta de entrada para encher a ocular posterior e, ao mesmo tempo, puxar lentamente o meio de perfusão através da seringa de saída para remover quaisquer bolhas de ar das linhas. Assim que os tubos de entrada e saída estiverem livres de bolhas de ar, pare a infusão e trave as torneiras na posição desligada.

Remova a seringa do conjunto do filtro de importação IOP e reabasteça a seringa com 30 mililitros adicionais de meio. Em seguida, reinsira a configuração da seringa no conjunto do filtro. Para configurar a câmara ICP, coloque a câmara sobre a parte posterior do segmento posterior, tomando cuidado para que o nervo óptico esteja dentro da câmara superior, e sele a câmara superior com 4 parafusos.

Em seguida, insira a tubulação nas portas de entrada e saída da câmara ICP - a seringa de entrada ICP na porta de entrada e a seringa de saída ICP vazia na porta de saída para lavar o sistema com meio, como acabamos de demonstrar.