Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 3:18 min. • April 28th, 2025
Pegue um aparelho de perfusão cardíaca conectado a um sistema de aquisição de dados.
Posicione um cateter com vários eletrodos para estimulação elétrica e monitoramento do ritmo cardíaco.
Pegue um coração de camundongo com uma cânula inserida na aorta e conecte-o ao aparelho.
Perfundir o coração com um tampão de perfusão oxigenado para imitar a circulação fisiológica.
Insira o cateter no átrio e ventrículo direitos.
O sistema de condução cardíaca, composto por células marcapasso e fibras de condução, coordena a contração sincronizada das câmaras cardíacas.
Aplique estimulação elétrica através do cateter para estabilizar as condições eletrofisiológicas do coração.
Feche a câmara para manter uma temperatura estável.
Aplique uma estimulação controlada para medir a atividade cardíaca basal.
Em seguida, aumente a frequência de estimulação para anular o ritmo normal do coração, desencadeando ritmos irregulares originados nos ventrículos, conhecidos como arritmia ventricular.
Após a estimulação, o retorno do coração ao ritmo normal sugere resistência à arritmia, enquanto ritmos anormais contínuos indicam suscetibilidade.
Comece iniciando o banho-maria e colocando a solução de perfusão, incluindo uma mistura de 95% de oxigênio e 5% de dióxido de carbono. Em seguida, ajuste a taxa de bombeamento antes de conectar o coração para que não fiquem bolhas de ar na cânula ao montá-la no aparelho. Defina a pressão de perfusão alvo para 80 milímetros de mercúrio nas configurações gerais e comece a gravar.
Use um cateter de eletrofisiologia com eletrodos de platina e superfície do eletrodo de 0,5 por 0,5 milímetros, com espaçamento de eletrodos de 0,5 milímetros para o registro de dados e estimulação com um gerador de estímulo digital designado. Em seguida, coloque o cateter próximo à área onde o coração será posicionado após a fixação ao aparelho. Em seguida, conecte a cânula rapidamente ao aparelho de Langendorff e certifique-se de que não haja bolhas na cânula. Mude a pressão de perfusão para 80 milímetros de mercúrio, permitindo uma perfusão de pressão constante.
Insira o cateter cuidadosamente no átrio direito e no ventrículo direito sem tocar ou danificar o coração e prenda o cateter à cânula com fita adesiva. Em seguida, inicie a estimulação com a duração do ciclo preparada de 100 milissegundos para um período inicial de equilíbrio de 20 minutos. Por fim, feche a câmara para permitir uma temperatura estável.
Comece aplicando uma estimulação programada através dos eletrodos distais ou proximais do cateter com o dobro do limiar de estimulação atrial ou ventricular para avaliar os parâmetros eletrofisiológicos. Em seguida, execute um protocolo de estimulação extra programada ou estimulação de ruptura de acordo com as convenções de Lambeth para avaliar a gênese da arritmia ventricular.