Realizando a axotomia de esmagamento no nervo facial em um modelo de camundongo

Comece com um camundongo anestesiado colocado de lado, com a orelha direita fixa e a área atrás da orelha raspada.

Trace a veia auricular posterior e faça uma pequena incisão para acessar os tecidos subjacentes.

Disseque as camadas de tecido enquanto evita danos às estruturas próximas.

Use um cotonete para parar qualquer sangramento.

Localize o nervo facial branco.

Identifique o canal auditivo, uma estrutura branca perolada e o ventre do músculo digástrico como pontos de referência importantes para localizar com precisão o nervo facial.

Disseque ao redor desses pontos de referência para expor o tronco do nervo facial contendo um feixe de fibras axonais que transmitem sinais aos músculos faciais.

Mantenha a área exposta aberta e, usando uma pinça, esmague suavemente o tronco do nervo facial com pressão constante.

Repita o esmagamento no mesmo local a partir de um ângulo perpendicular.

Este esmagamento controlado induz estresse mecânico nas fibras do axônio, resultando em danos e interrupção da sinalização neuronal.

Para determinar a localização da primeira incisão, trace a veia auricular posterior da orelha caudalmente até a área posterior da protuberância da orelha. Em seguida, usando uma tesoura de mola, faça uma incisão de 4 milímetros 2 a 3 milímetros posterior à protuberância. Para fins de ensino, esta incisão será ampliada para expor a anatomia subjacente.

Agora, faça uma dissecção romba da gordura subcutânea e da fáscia. Os vasos sanguíneos e os músculos podem ser facilmente danificados por tesouras. Se ocorrer sangramento, aplique pressão com um cotonete estéril por pelo menos 30 segundos. Se ocorrer perda significativa de fluido, injete até 1/2 mililitro de solução salina por via intraperitoneal com uma agulha de calibre 25 ou 27.

Agora, localize o nervo facial usando os principais pontos de referência. O nervo acessório espinhal é superficial ao nervo facial e pode ser visto viajando da porção caudal do crânio, para inervar o músculo trapézio. Identifique o canal auditivo cartilaginoso. É branco perolado e pode ser visto rostral ao nervo facial. O nervo facial envolve a porção caudal do canal auditivo.

Em seguida, identifique o ventre muscular do músculo digástrico anterior que fica no topo e caudal ao nervo facial. Disseque sob essa estrutura para expor o nervo facial. É uma estrutura branca sólida aderida a uma camada de fáscia subjacente. Identifique os principais ramos do nervo facial. Rastreie-os dorsalmente até sua origem a partir do forame estilomastóideo.

Use uma pinça fina para manter o local aberto enquanto usa a ponta da tesoura de mola para dissecar ao longo do trajeto do nervo facial. O forame estilomastóideo ósseo pode ser sentido pela pinça. Agora, identifique o tronco do nervo facial. Para esmagar o nervo, comprima-o com a pinça fina por 30 segundos com pressão constante. Isso cortará todos os axônios. Em seguida, repita a compressão em um ângulo perpendicular por mais 30 segundos. Mantenha a pressão consistente entre os experimentos.