Gerando um modelo de rato de glioblastoma

Pegue um rato anestesiado.

Raspe o couro cabeludo. Em seguida, aplique gel para os olhos para manter a hidratação da córnea.

Prenda o animal em uma estrutura estereotáxica e desinfete o local da cirurgia. Faça uma incisão na linha média e retraia-a para expor o crânio.

Faça um furo no hemisfério frontal direito para acessar o córtex pré-frontal.

Posicione uma seringa guiada estereotáticamente contendo uma suspensão de células de glioblastoma, ou tumor cerebral, sobre o local perfurado.

Usando um controlador de bomba, injete a suspensão celular no córtex pré-frontal.

Retire lentamente a agulha para evitar o refluxo das células injetadas. Em seguida, sele o local perfurado com cera óssea.

Suture a incisão cirúrgica e desinfete o local.

Retorne o rato à sua gaiola e use uma lâmpada vermelha para manter a temperatura corporal.

Após a injeção, as células tumorais cerebrais proliferam, infiltram-se no tecido circundante e induzem a angiogênese, interrompendo a função cerebral normal e gerando um modelo de glioblastoma.

Para inocular o cérebro de uma fêmea de 170 gramas anestesiada com células de glioma, primeiro confirme a sedação por falta de resposta ao beliscão do dedo do pé. Remova o cabelo do nível dos olhos até a parte de trás do crânio e aplique pomada nos olhos do animal. Imobilize o animal em um dispositivo estereotáxico. Desinfete a pele exposta com iodopovidona e exponha o crânio com uma incisão no couro cabeludo na linha média de 2 centímetros. Usando uma broca de diamante, faça um furo de 1 milímetro, 2 milímetros posterior e 2 milímetros e meio lateral ao bregma no hemisfério frontal direito.

Em seguida, carregue a agulha de uma seringa de insulina de calibre 29 com 5 microlitros de suspensão celular. E use um controlador de bomba de micro-seringa para injetar as células de três milímetros de profundidade no crânio sob orientação estereotáxica e retire a agulha lentamente. Feche a incisão com cera óssea. Em seguida, suture e desinfete a pele com mais iodo povidona. E use uma lâmpada vermelha para estabilizar a temperatura corporal do animal, pós-cirurgia, com monitoramento até a recuperação total.