Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 2:48 min. • April 28th, 2025
Comece com um camundongo anestesiado com um osso do crânio exposto.
Aplique um agente de condicionamento para remover o periósteo e criar uma superfície mais limpa.
Posicione o suporte de óculos com armações de lentes de forma que os olhos fiquem centralizados dentro das armações.
Aplique adesivo no suporte e deixe-o endurecer, prendendo-o ao crânio.
Remova as armações da lente para minimizar o desconforto durante a recuperação.
Injete intraperitonealmente um agente de recuperação para recuperar o camundongo.
Quando o mouse estiver acordado, recoloque a armação contendo lentes côncavas cobrindo os olhos.
Essas lentes dispersam a luz recebida, fazendo com que ela convirja para trás da retina e resultando em visão turva.
Os neurônios da retina detectam o borrão e sinalizam ao cérebro para alongar o globo ocular para focar a luz na retina para uma visão clara.
Depois que as lentes são removidas, o globo ocular alongado faz com que a luz convirja na frente da retina, prejudicando a visão de perto no camundongo e resultando em miopia.
Para fixar a armação dos óculos previamente preparada no mouse, primeiro aplique uma gota de colírio de hialuronato de sódio purificado a 0,1% em cada olho e coloque o queixo do camundongo anestesiado em uma superfície inclinada, de modo que o plano frontal do crânio fique horizontal. Use um cotonete embebido em etanol 70% para esterilizar o cabelo e o couro cabeludo entre as orelhas e os olhos e faça uma incisão de 0,8 centímetro quadrado na pele entre as orelhas e os olhos para expor o crânio. Use líquido de condicionamento dental em um cotonete para remover o periósteo e use um par de armações sem lentes para ajudar a fixar o bastão na posição correta, ajustando cuidadosamente a posição das armações para garantir que ambos os olhos estejam no meio das armações vazias.
Use um sistema adesivo dental autopolimerizável para prender o bastão na cabeça do mouse e espere cerca de cinco minutos antes de remover cuidadosamente a moldura e a porca sem alterar a posição do bastão. Em seguida, injete 0,75 miligramas por quilograma de cloridrato de atipamezol por via intraperitoneal para ajudar o camundongo a se recuperar da anestesia mais rapidamente e coloque o camundongo em uma gaiola individual até que esteja totalmente recuperado. 24 horas após a cirurgia, segure o bastão e coloque as armações com lentes no animal para iniciar a indução da miopia.