Gerando um modelo de camundongo com uma lesão na medula espinhal

Comece com um camundongo anestesiado com os pelos removidos no lado dorsal.

Aplique pomada para evitar o ressecamento da córnea.

Esterilizar sequencialmente a pele usando betadina, seguido de etanol.

Injete anestesia local no local da incisão.

Localize a vértebra torácica ou T13 identificando as últimas costelas flutuantes. Em seguida, identifique as vértebras T8-T12 e faça uma incisão na linha média.

Remova o tecido adiposo subcutâneo para acessar os músculos paraespinhais.

Limpe esses músculos para expor as lâminas vertebrais.

Disseque as lâminas das vértebras T9-T10 para acessar a medula espinhal.

Atravessar a medula espinhal completamente para induzir uma lesão medular ou LME.

Coloque um pedaço de gordura subcutânea sobre o local da cirurgia para proteger a medula espinhal.

Suture os músculos e o tecido conjuntivo e, em seguida, feche a incisão na pele.

O modelo SCI Mouse está pronto para estudos adicionais.

Anestesiar os animais e aplicar a pomada oftálmica nas córneas para proteger os olhos do ressecamento durante o procedimento cirúrgico. Em seguida, esfregue a pele do animal três vezes cada com esfoliante betadine e etanol a 70%.

Antes da incisão, use uma seringa com agulha de calibre 25 para injetar 100 microlitros de bupivicaína a 0,125% ao redor do local da incisão como analgesia. Conte a partir das nervuras flutuantes que correspondem a T13 para identificar T8 a T12. Depois de criar uma incisão de 1 a 1,5 centímetro ao longo da linha média nas costas no nível da vértebra T8 a T12, limpe o tecido adiposo subcutâneo para acessar os músculos paraespinhais. Em seguida, disseque-os lentamente para expor os processos espinhosos e a lâmina em ambos os lados.

É muito importante fazer este procedimento com muito cuidado para evitar sangramento excessivo e qualquer lesão na medula espinhal.

Realize uma laminectomia das vértebras T9 a T10 para expor a medula espinhal, retirando suavemente a lâmina espinhal usando uma pinça de microdissecação. Use uma pinça para prender e levantar a coluna vertebral em T8 para exagerar a curvatura da coluna vertebral. Em seguida, use uma tesoura fina para seccionar a medula espinhal entre as vértebras T9 e T10, até o assoalho do canal vertebral para garantir a transecção completa.

Depois de observar a transecção completa sob um microscópio cirúrgico, aplique um pedaço de gordura subcutânea sobre o local da laminectomia para fornecer proteção adicional à medula espinhal antes do fechamento do local da cirurgia. Por fim, feche a ferida e suture os músculos paravertebrais e a fáscia superficial. Em seguida, feche a pele usando clipes de sutura.