Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 2:08 min. • April 28th, 2025
Comece com uma amostra de tecido cerebral, que não é transparente devido à presença de pigmentos e lipídios. Esses componentes causam dispersão de luz em neurônios marcados com fluorescência.
Incube sequencialmente o tecido em soluções com concentrações crescentes de metanol para remover a água dele e desidratar o tecido gradualmente.
Em seguida, trate este tecido com metanol concentrado para eliminar a água residual, garantindo a desidratação completa.
Em seguida, transfira o tecido para um solvente de limpeza inicial contendo diclorometano e metanol.
Incube com agitação suave para permitir que o solvente penetre profundamente no tecido.
O diclorometano remove pigmentos e lipídios do tecido, reduzindo a dispersão da luz e aumentando a transparência.
Finalmente, transfira o tecido para éter dibenzílico, um solvente hidrofóbico e incube sem agitar.
O solvente atua como o agente de limpeza final que aumenta ainda mais a transparência do tecido.
Este processo melhora a penetração da luz, permitindo uma visualização mais clara dos neurônios marcados e suas conexões no tecido cerebral amostra.
Incube a amostra em série em metanol a 20%, 40%, 60%, 80% e 100% por uma hora cada à temperatura a
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