Microscopia de Imunofluorescência de Células Neurais Diferenciadas de Células Derivadas do Sangue Periférico

Pegue uma lâmina multicâmara com lamínulas revestidas de proteínas contendo células neurais derivadas do sangue periférico fixas e permeabilizadas, incluindo células progenitoras neuronais, astrócitos e neurônios.

Adicione uma solução de bloqueio para bloquear sites de ligação não específicos.

Incube com anticorpos conjugados com corante fluorescente que se ligam a proteínas celulares específicas, permitindo a identificação de tipos de células neurais.

Lave com tampão para remover anticorpos não ligados.

Incube com um corante nuclear fluorescente para corar os núcleos.

Transfira a lamínula para um slide com mídia de montagem. Em seguida, coloque a lâmina preparada sob um microscópio de fluorescência equipado com filtros apropriados.

Usando comprimentos de onda específicos de luz, excite os corantes fluorescentes, fazendo com que eles emitam luz em comprimentos de onda mais longos.

Os sinais fluorescentes emitidos correspondem às proteínas celulares marcadas, destacando distintamente diferentes tipos de células neurais e confirmando a diferenciação de células sanguíneas reprogramadas.

Adicione uma solução de bloqueio de PBS e 5% de BSA. Bloqueie as células à temperatura ambiente em uma pl