Imagem microscópica de neurônios em uma seção do cérebro de camundongo usando coloração metálica de Golgi-Cox

Comece com uma seção espessa do cérebro que foi corada com solução de Golgi-Cox para escurecer seletivamente os neurônios e contracorada com violeta de cresil para destacar a região do cérebro.

Coloque-os em uma lâmina que foi pré-tratada com um agente de limpeza para aumentar a transparência do tecido.

Coloque a lâmina na platina do microscópio, aplique óleo de silicone e abaixe a lente objetiva até que ela entre em contato com o óleo.

O óleo de silicone corresponde ao índice de refração da lente objetiva e da lâmina, permitindo imagens detalhadas.

Foca na amostra e, em seguida, ajusta a exposição e o balanço de brancos da câmara para obter a melhor qualidade de imagem.

Foca na camada superior para definir o limite superior e, em seguida, na camada inferior para definir o limite inferior.

Ajuste o espaçamento entre imagens com sobreposição suficiente para captar detalhes de projeções neuronais.

Repita a imagem em locais diferentes para capturar áreas de interesse e, em seguida, sobreponha essas imagens para criar uma representação tridimensional dos neurônios.

Para capturar pilhas de imagens de alta resolução da área que contém o neurônio de interesse, primeiro selecione uma objeti