Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 4:02 min. • April 28th, 2025
Comece com um camundongo transgênico anestesiado com uma janela circular de imagem de vidro e uma placa de cabeça implantada em seu crânio.
As células e neurônios microgliais ou imunológicos são marcados com proteínas fluorescentes.
Em seguida, prenda o mouse no estágio do microscópio de dois fótons.
Em seguida, injete um corante fluorescente intraperitonealmente para manchar os vasos sanguíneos de vermelho.
Limpe a janela de imagem de vidro, aplique uma gota salina e abaixe a objetiva do microscópio.
Em seguida, defina a luz do laser para capturar uma imagem dos vasos sanguíneos. Registre o padrão de ramificação e as coordenadas para localizar e criar imagens da mesma região posteriormente.
Agora, defina o laser para excitar as proteínas fluorescentes, fazendo com que a microglia e os neurônios fiquem fluorescentes.
Usando o padrão de ramificação registrado, localize a mesma região e capture regularmente imagens de células.
A rede vascular e os neurônios permanecem estáveis, enquanto a posição microglial muda ao longo do tempo reflete a dinâmica imunológica em resposta à atividade neuronal.
Faça uma abertura circular de aproximadamente 4 milímetros no crânio usando uma broca odontoló
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