Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 2:36 min. • May 29th, 2025
Pegue um camundongo transgênico anestesiado expressando proteínas fluorescentes em neurônios piramidais esparsos.
O camundongo é implantado com uma cânula de imagem sobre o hipocampo dorsal.
Posicione o mouse sob o microscópio de dois fótons em uma almofada de aquecimento, prendendo a placa da cabeça da cânula ao suporte para imobilizar sua cabeça.
Aplique pomada para evitar o ressecamento da córnea.
Limpe a cânula com água deionizada e inspecione-a sob uma objetiva de baixa ampliação para verificar se há detritos, danos ou problemas de fluorescência.
Alinhe a cânula de imagem com o eixo óptico do microscópio para obter imagens precisas.
Em seguida, mude para uma objetiva de alta resolução de imersão em água.
Encha a cânula com água deionizada, garantindo que não haja bolhas de ar para evitar distorção da imagem.
Realize imagens longitudinais de dois fótons usando luz infravermelha para excitar seletivamente fluoróforos no plano focal, permitindo imagens de tecidos profundos.
A cânula implantada facilita o acesso repetido ao hipocampo dorsal para rastrear as alterações dendríticas ao longo do tempo.
Posicione o mouse sob o microscópio sobre o tapete de aquecimento e prenda a placa da cabe
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