Monitoramento da recuperação de células interneuromast abladas por laser em peixe-zebra usando microscopia confocal

Comece com uma larva de peixe-zebra contendo células interneuromastóides marcadas com fluorescência ou INMCs, montadas em uma lamínula e colocadas sob um microscópio confocal.

As INMCs são células progenitoras com capacidade regenerativa que foram previamente submetidas à ablação a laser.

Primeiro, observe a área danificada no modo de fluorescência. A ausência de fluorescência confirma a ablação a laser bem-sucedida.

Em seguida, use o modo de imagem de luz transmitida para examinar a área danificada onde a célula parece granular e inchada com núcleos irregulares, confirmando a morte celular.

O recrutamento de macrófagos para o local indica uma resposta celular ativa à lesão.

Agora, volte para o modo de fluorescência e capture imagens de lapso de tempo em intervalos regulares para monitorar a recuperação.

Durante a fase de recuperação, os INMCs estendem as projeções para a lacuna, facilitando o fechamento e promovendo o reparo celular.

Salve essas imagens de séries temporais para análise. O reaparecimento de fluorescência distinta na área ablacionada confirma a recuperação celular bem-sucedida.

Para imagens dos corpos celulares pós-ablação, no menu Canais, desmarque a trilha DAPI para