Monitoramento morfológico e fisiológico de esferoides tumorais por meio de tomografia de coerência óptica

Comece com uma placa de vários poços contendo esferoides tumorais, um agregado tridimensional de células cancerígenas.

Coloque-o em uma tomografia de coerência óptica ou estágio de imagem OCT, garantindo que ele esteja estabilizado para imagens precisas.

Ajuste a lente para obter o foco de luz ideal, defina os parâmetros de digitalização e inicie a captura de imagem ao longo do tempo.

À medida que a luz interage com as células, ela reflete em intensidades variadas, dependendo das estruturas e profundidades celulares.

A OCT captura essas intensidades de luz refletidas e constrói imagens transversais bidimensionais de alta resolução em diferentes planos.

Mova a placa para adquirir as imagens dos esferóides tumorais de todos os poços.

Usando um software, alinhe essas imagens e processe-as para criar um modelo esferóide tridimensional, revelando suas características morfológicas, incluindo tamanho, forma e estrutura.

Com o tempo, as células do esferóide morrem e suas estruturas danificadas aumentam a dispersão da luz, reduzindo a intensidade da luz refletida.

Isso diferencia as células viáveis das não viáveis, permitindo o monitoramento das condições fisiológicas.

No dia da imagem dos esferóides do tumor, remova a placa de vários poços da incubadora. Transfira-o para o sistema de imagem OCT e coloque-o no adaptador de placa. Para ajustar a altura da placa, mova-a ao longo da direção z do estágio de translação. No software de imagem personalizado, defina um intervalo de varredura OCT desejado para cobrir todo o esferóide do tumor, dependendo de seus estágios de desenvolvimento, e clique em Salvar parâmetros para salvar a configuração.

Em seguida, mostre as visualizações otimizadas de OCT xz e yz de esferoides tumorais. Adquira imagens 3D OCT de esferoides tumorais, um por um, para todos os poços da placa contendo esferoides. Para visualizar a imagem de visualização, clique no botão Visualizar. E para adquirir a imagem da OCT, clique no botão adquirir. Registre o processo geral de movimentação do estágio de aquisição de dados da OCT.

- Para garantir a qualidade de imagem ideal para todos os esferoides tumorais, o adaptador de placa precisa ser ajustado com precisão e o volume médio precisa ser o mesmo.

- Use um código de processamento C++ personalizado para processar conjuntos de dados 3D OCT de esferoides tumorais para gerar imagens estruturais OCT. Use imagens OCT 2D em 3 planos transversais xy, xz e yz através do centróide do esferóide para gerar a colagem de imagens esferoides.