Visualização de mitocôndrias dentro das fibras nervosas intraepidérmicas
Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 5:37 min. • May 29th, 2025
Comece com uma seção de tecido cutâneo epidérmico contendo fibras nervosas intraepidérmicas ou IENFs, terminações finas de neurônios sensoriais.
Os IENFs são ricos em mitocôndrias, fornecendo energia para a transmissão do sinal dos neurônios.
O tecido tem IENFs, mitocôndrias e núcleos epidérmicos marcados com fluorescência.
Usando um microscópio confocal invertido, adquira sequencialmente sinais fluorescentes discretos em comprimentos de onda apropriados para os núcleos, IENFs e mitocôndrias.
Ative uma varredura ao vivo para capturar o sinal IENF, abrangendo a camada epidérmica.
Em seguida, execute a varredura sequencial de cada sinal para eliminar a diafonia do sinal de fluorescência.
A partir da imagem combinada, usando o software, corte e isole as células epidérmicas fluorescentes azuis.
Em seguida, processe a área recortada para melhorar a resolução dos sinais IENF verdes e mitocondriais vermelhos.
Em seguida, gere uma imagem de superfície 3D para criar uma máscara para IENFs e, em seguida, sobreponha a imagem da superfície mitocondrial para isolar mitocôndrias específicas do nervo.
Na saída final, os IENFs aparecem em ciano, enquanto as mitocôndrias aparecem como minúsculas estrutur
Veja a transcrição completa e aceda a milhares de vídeos científicos