Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 2:31 min. • May 29th, 2025
Comece com uma câmara de imagem contendo um explante cerebral de Drosophila imobilizado submerso em um tampão para manter a função celular.
Os neurônios no cérebro expressam indicadores citoplasmáticos fluorescentes de cálcio, que se ligam a íons de cálcio e fluoresce.
Coloque a câmara de imagem sob um microscópio de fluorescência equipado com uma lente de imersão em água.
Abaixe a lente e, sob iluminação de campo claro, foque no cérebro.
Mude para o modo de fluorescência e capture a imagem.
Em seguida, introduza um neuropeptídeo no tampão e inicie a gravação de lapso de tempo.
O neuropeptídeo se liga ao seu receptor nos neurônios, desencadeando a sinalização intracelular. Isso abre os canais de cálcio e permite o influxo de íons de cálcio.
Esses íons de cálcio se ligam aos indicadores e aumentam a intensidade da fluorescência.
Recapture a imagem após a estimulação do neuropeptídeo.
Compare as imagens antes e depois da estimulação do neuropeptídeo.
Um aumento na intensidade da fluorescência após a estimulação do neuropeptídeo reflete a resposta do cérebro da Drosophila à sinalização do neuropeptídeo.
Para adquirir imagens de fluorescência de cálcio, coloque a câmara de imagem contendo o expl
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