Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 3:54 min. • May 29th, 2025
Prenda uma Drosophila transgênica imobilizada com a cabeça exposta em uma câmara de gravação em um microscópio de fluorescência stage.
O corpo do cogumelo da mosca compreende neurônios que expressam proteína de fusão bioluminescente sensível ao cálcio, que é ativada por um cofator pré-carregado.
Conecte um tubo de perfusão à câmara. Localize os corpos dos cogumelos fluorescentes, concentrando-se no cálice e nos lobos mediais. Confirme a drenagem com tampão.
Defina os parâmetros de imagem e concentre-se no cálice e nos lobos mediais. No escuro, adquira imagens de fluorescência de linha de base dos corpos dos cogumelos antes da exposição ao estimulante.
Perfundir nicotina em tampão contendo cálcio para ativar os receptores nicotínicos de acetilcolina, desencadeando o influxo de cálcio e a emissão de luz bioluminescente.
Lavar com tampão para restaurar as condições basais.
Perfundir cloreto de potássio para despolarizar os neurônios, desencadeando a liberação intracelular de cálcio e emissão de sinais bioluminescentes.
Lavar com tampão para restaurar as condições basais.
Analisar imagens para avaliar a atividade espacial e temporal do cálcio no cálice e nos lobos mediais.
- Em seguida, co
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