Microscopia de dois fótons para imagens in vivo de microvasculatura cerebral de camundongos

0 visualizações • 2:58 min. • May 29th, 2025

Comece com um camundongo anestesiado com uma placa de cabeça presa sobre uma janela cortical de crânio fino preparada cirurgicamente.

Posicione o mouse em decúbito dorsal. Remova a pele medial da coxa para expor a veia femoral.

Injete um corante fluorescente conjugado na veia para marcar o plasma sanguíneo, permitindo a visualização dos vasos sanguíneos.

Suturar a incisão.

Vire o mouse e prenda a placa de cabeça em um arnês para estabilizar o mouse.

Transfira a configuração para um estágio de microscópio de dois fótons.

Adicione solução salina sobre a janela cortical. Abaixe a lente objetiva até que ela entre em contato com a solução salina.

Usando iluminação de campo claro, localize a região de imagem.

Mude para imagens de dois fótons.

O laser do microscópio concentra a luz infravermelha próxima de baixa energia no cérebro.

No ponto focal do laser, dois fótons combinam sua energia para excitar o corante, tornando os vasos sanguíneos fluorescentes.

Identifique um leito capilar - uma rede de pequenos vasos sanguíneos que conectam artérias a veias - e amplie-o.

Adquira imagens para analisar a microvasculatura do cérebro.

Neste procedimento, remova a pele da coxa esquerda medial do camundongo. Em

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