Ultrassom não invasivo de alta frequência e imagem Doppler da hemodinâmica do cérebro de ratos

Posicione um rato anestesiado na estação de imagem com uma máscara nasal para manter a anestesia.

Remova o pelo ao redor das orelhas e pescoço para evitar interferência na imagem de ultrassom.

Organize o animal para estender seus membros. Aplique creme de eletrodo nos sensores e prenda as patas para monitorar os parâmetros vitais.

Aplique gel de ultrassom na cabeça e no transdutor do rato para uma transmissão eficaz do ultrassom.

Em seguida, incline a bancada para expor o lado temporal da cabeça.

Alinhe o transdutor verticalmente para obter imagens de estruturas cerebrais mais profundas.

Defina os parâmetros de aquisição do modo B de ultrassom. Durante a imagem, o transdutor emite ondas de ultrassom que refletem nas interfaces do tecido, gerando um mapa em tons de cinza da anatomia do cérebro.

Ajuste o transdutor para alinhar com a região do cérebro alvo.

Mude para o modo Doppler colorido para visualizar os vasos sanguíneos cerebrais.

Ajuste os parâmetros para permitir a detecção em tempo real da velocidade e direção do fluxo sanguíneo.

Deite o rato em uma bancada de ultrassom e estação de imagem fotoacústica e posicione rapidamente o nariz dentro da máscara apropriada, proporcionando um fluxo constante de anestesia. Para depilar o animal, espalhe uma camada consistente de creme depilante na superfície da cabeça, cobrindo as áreas ao redor das orelhas e pescoço. Depois de deixar o creme agir por vários minutos, retire-o suavemente com uma espátula. Remova suavemente todos os restos de creme com uma esponja úmida para limpar a pele com precisão.

Para posicionar o rato, arrume o animal em uma posição de águia aberta. Incline as patas nos sensores de parâmetros vitais na bancada depois de aplicar algumas gotas de creme de eletrodo para monitorar os sinais vitais. Por fim, prenda os membros com um adesivo de seda artificial hipoalergênico.

Em seguida, descarte uma camada consistente de gel de transmissão de ultrassom hipoalergênico e solúvel em água na cabeça do animal. Cubra a cabeça do transdutor com uma fina camada do mesmo gel e coloque-a em contato com a camada do rato. Levante a cabeça do animal e gire-a ligeiramente para um lado.

Use um rolo de algodão como suporte, mantendo o focinho bem inserido na máscara de anestesia. Incline a bancada em um ângulo de cerca de 30 graus em relação ao plano horizontal. Gire o transdutor de imagem em um ângulo de cerca de 30 graus em relação ao plano vertical.

Para aquisição de imagens anatômicas e vasculares ultrassônicas e fotoacústicas, ative a varredura de imagem. Entre na aquisição de imagem no modo B e defina corretamente todos os parâmetros de aquisição de imagem para respeitar os possíveis requisitos do experimento. Defina a frequência do centro de transmissão o mais baixa possível para ter a profundidade máxima de penetração do transdutor.

Inicie a aquisição da imagem no modo B e ajuste o posicionamento do transdutor em tempo real, identificando referências anatômicas e centralizando a região de interesse no ponto médio do monitor. Coloque o transdutor para alinhá-lo ao eixo virtual, conectando a orelha ao olho para obter uma focalização ideal do feixe. Adquira diferentes visões do volume interno do cérebro girando no sentido horário ou anti-horário. Certifique-se de que a região cerebral de interesse esteja localizada a 10 milímetros de profundidade em relação à fonte do transdutor de laser de ultrassom para receber um sinal de resposta fotoacústica ideal.

Em seguida, entre no modo Doppler colorido para visualizar os vasos sanguíneos internos do cérebro de maneira altamente sensível. Em seguida, escolha o parâmetro de aquisição desejado definido no modo Doppler colorido. Adquira imagens nesta modalidade para distinguir velocidades e direções da corrente sanguínea até vários milímetros de profundidade de penetração.