Imagem de refletância difusa multiespectral do fluxo sanguíneo cerebral de ratos e estrutura tecidual

Comece com um rato anestesiado preparado com uma janela craniana expondo vasos sanguíneos e tecidos corticais.

Coloque o rato em um estágio de imagem, garantindo que ele permaneça conectado a um bocal que administra anestesia e uma mistura de gases para regular os níveis de oxigênio.

Foque a câmera na superfície do cérebro. Passe a luz de banda larga através de um filtro para isolar comprimentos de onda específicos.

Um guia de luz e uma lente coletora direcionam a luz filtrada para o tecido cortical.

Dentro do tecido, a luz é absorvida pela hemoglobina, dependendo de seu estado de oxigenação, e espalhada pelas células, produzindo refletância difusa.

Capture essa luz espalhada usando a câmera, otimizando o brilho ajustando o tempo de integração.

Repita a imagem em vários comprimentos de onda com uma roda de filtro rotativa para coletar dados espectrais.

Por fim, bloqueie o caminho da luz para capturar uma imagem escura e, em seguida, subtraia-o das imagens espectrais para remover o ruído.

Essas imagens processadas revelam o fluxo sanguíneo cerebral, a oxigenação e a estrutura do tecido.

Comece colocando suavemente o rato no palco e ajuste lentamente o nível do palco para que a câmera possa focar na superfície do cérebro do rato. No software de aquisição de imagem, selecione o comando Salvar no menu Arquivo para salvar uma imagem em um arquivo, nomeando-a de acordo com a amostra e o comprimento de onda.

Em seguida, altere a localização do filtro girando a roda do filtro. Repita a aquisição da imagem em cada um dos nove comprimentos de onda. Em seguida, desligue a fonte de luz da lâmpada halógena. Bloqueie o caminho da luz para o sistema de câmera monocromático do dispositivo de carga acoplada usando uma placa de blindagem. Por fim, selecione o comando Salvar no menu Arquivo e escolha um nome de arquivo que identifique o exemplo.