Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 3:25 min. • June 17th, 2025
Comece com um mouse acordado posicionado sob um microscópio holográfico de dois fótons integrado com moduladores de luz espacial ou SLMs.
O mouse segura uma placa de cabeça pré-implantada.
No cérebro do camundongo, os neurônios expressam canais sensíveis à luz vermelha e indicadores de cálcio fluorescentes verdes que se ligam aos íons de cálcio.
Para estudar a atividade neural e a conectividade, defina os parâmetros de imagem.
Use um laser de 920 nanômetros para excitar indicadores ligados ao cálcio dentro dos neurônios. Capture a imagem de fluorescência do neurônio com o mínimo de fotodano.
Redefina os parâmetros de imagem e foque um feixe de laser infravermelho próximo.
Os SLMs moldam o feixe de laser em padrões holográficos precisos que permitem o foco seletivo nos neurônios-alvo em vários pontos.
Isso estimula os canais sensíveis à luz, causa o influxo de íons de cálcio e aumenta a fluorescência dos neurônios-alvo.
Os neurônios-alvo ativados transmitem sinais para os neurônios conectados e aumentam a fluorescência do neurônio conectado.
Novamente, capture uma imagem de dois fótons. Um aumento da fluorescência nos neurônios-alvo e conectados confirma a atividade neuronal e a conectividad
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