Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 3:15 min. • June 17th, 2025
Comece com um explante de retina de camundongo pós-natal vivo montado em um filtro de membrana e colocado em uma câmara de incubação sob um microscópio confocal.
A retina é transfectada para expressar uma proteína fluorescente nas membranas dos interneurônios amácrinos starburst.
Coloque um peso de amostra pré-umedecido na retina para estabilizá-la.
Encha a câmara com tampão.
Mantenha o fluxo e a temperatura ideais do tampão na câmara para preservar a viabilidade neuronal.
Posicione uma objetiva de imersão em água na câmara de imagem.
Inicie a imagem de epifluorescência.
A luz do laser, direcionada através da objetiva, excita a proteína fluorescente nas células amácrinas.
A fluorescência emitida é captada através da mesma objetiva, permitindo a visualização das células amácrinas marcadas.
Identifique uma célula fluorescente brilhante para geração de imagens.
Defina os parâmetros de imagem.
Capture imagens em vários planos Z para obter uma visualização 3D da morfologia dendrítica completa.
Realize imagens de lapso de tempo para rastrear mudanças na morfologia dendrítica ao longo do tempo.
Monte a câmara de incubação de imagem ao vivo e encha-a com aCSF oxigenado. Ligue a bomba e o controlador d
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