Implantação de janela da medula espinhal em um camundongo para imagens in vivo

Comece com um camundongo anestesiado com a medula espinhal exposta cirurgicamente.

Coloque uma lamínula de borossilicato sobre a medula espinhal para criar uma janela óptica para imagens.

Aplique agarose quente nas bordas da lamínula, permitindo que a ação capilar a puxe para baixo para manter a hidratação do tecido.

Introduza adesivo tecidual nas estruturas ósseas intactas ao redor do local para estabilizar a janela da medula espinhal.

Aplique cimento dental misturado com um acelerador sobre a camada adesiva e, em seguida, posicione uma placa traseira impressa em 3D sobre a lamínula antes que o cimento cure.

Aplique camadas finas adicionais de cimento para fortalecer a adesão da placa traseira.

Depois que o cimento secar, prenda a placa traseira a um suporte de placa traseira bifurcado para minimizar os artefatos de movimento da respiração e dos batimentos cardíacos.

Adicione solução salina para verificar se há vazamentos e sele com cimento adicional, se necessário.

Por fim, transfira o mouse e a plataforma para um microscópio de dois fótons para geração de imagens.

Para o implante da lamínula, aplique suavemente uma lamínula de borossilicato de 3 milímetros no cordão exposto. Use uma peq