Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 4:17 min. • August 7th, 2025
Prenda um mouse anestesiado em uma estrutura estereotáxica.
Desinfete o couro cabeludo raspado e, em seguida, faça uma incisão na linha média para expor o crânio.
Seque o crânio e aplique peróxido de hidrogênio para melhorar a visibilidade do bregma.
Localize bregma e lambda e, em seguida, identifique os locais de destino.
Perfure cuidadosamente o crânio nos locais de destino.
Conecte a seringa cheia de vírus ao instrumento estereotáxico.
O vírus codifica Cas9 e um RNA de guia único para edição do genoma em neurônios do giro denteado, juntamente com um repórter fluorescente para rotular neurônios infectados.
Abaixe a seringa para alcançar o giro dentado e, em seguida, injete o vírus lentamente para garantir uma distribuição uniforme.
Levante gradualmente a seringa e repita a injeção em coordenadas adicionais.
Faça uma breve pausa para evitar o refluxo e, em seguida, retire a agulha lentamente.
Repita o procedimento no hemisfério oposto.
Finalmente, suturar a incisão.
O modelo agora está pronto para estudos adicionais.
Raspe a cabeça de um camundongo anestesiado para se preparar para o local da injeção. Direcione o isoflurano a 4% para o cone do nariz. Em seguida, coloque o mouse no instrumento
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