Tratamento intracerebroventricular com resiniferatoxina para dessensibilização de TRPV1 no cérebro de camundongos

Pegue uma microsseringa cheia de resiniferatoxina, um agonista de alta afinidade dos receptores TRPV1, canais iônicos sensíveis à dor expressos em neurônios sensoriais.

Passe a agulha por um tubo de metal, expondo uma extremidade curta da ponta para um direcionamento ventricular preciso.

Posicione um rato anestesiado de bruços e desinfete sua cabeça com álcool. Segure a cabeça com firmeza para estabilizar o crânio.

Mova a agulha lateralmente no couro cabeludo até que ela se prenda à sutura sagital.

Desloque a agulha para a direita e, em seguida, mova-se rostralmente para enganchar na sutura coronal.

Insira a agulha no ventrículo lateral direito e injete o RTX lentamente.

Segure a agulha brevemente para permitir a difusão do RTX e, em seguida, retire-a lentamente para evitar o refluxo.

O RTX se liga aos canais TRPV1 nos neurônios sensoriais do cérebro, causando influxo sustentado de cálcio e despolarização neuronal prolongada.

Isso desencadeia a dessensibilização do TRPV1 mediada pela fosforilação, seguida pela internalização do TRPV1 e degradação lisossômica, o que reduz a capacidade de resposta neuronal aos estímulos dolorosos.

Anestesiar um camundongo com pentobarbital sódico por via int