Entrega de células-tronco mesenquimais intranasais em um modelo de camundongo com lesão cerebral traumática

Comece com um camundongo anestesiado com uma lesão cerebral traumática.

No local da lesão, a desmielinização axonal e o dano neuronal desencadeiam a liberação de citocinas pró-inflamatórias.

Prenda o camundongo e forneça uma enzima proteolítica por via intranasal.

Em seguida, posicione o mouse voltado para cima por um curto período e repita a entrega da enzima.

As enzimas proteolíticas degradam a matriz extracelular no epitélio nasal e aumentam a permeabilidade celular.

Em seguida, administre por via intranasal a célula-tronco mesenquimal marcada ou a solução de MSC.

Mantenha a cabeça do camundongo ereta por um tempo para evitar a drenagem prematura e permitir a absorção de MSC no tecido nasal.

Repita o processo de entrega do MSC.

Permita que o mouse se recupere.

Os sinais quimiotáticos das citocinas pró-inflamatórias direcionam as MSCs a migrar da cavidade nasal para o local da lesão cerebral.

No local da lesão, as CTMs secretam fatores neurotróficos que promovem a remielinização. Isso destaca o potencial neuroterapêutico das MSCs para o reparo neuronal.

Para entrega celular, depois de confirmar a falta de resposta ao beliscão do dedo do pé, scruff o mouse enquanto imobiliza o crânio. Coloque a ponta de uma pipeta contendo 4 unidades de hialuronidase por microlitro de PBS perto da nara do camundongo em um ângulo de 45 graus e administre 3 microlitros de suspensão de hialuronidase em cada narina. Coloque o animal virado para cima em uma almofada limpa por cinco minutos antes de repetir o tratamento quatro vezes para um total de 100 unidades de tratamento com hialuronidase.

Após o último tratamento, coloque o mouse de volta no pad por 30 minutos antes de prender o mouse, como acabamos de demonstrar. Com a cabeça imobilizada, administrar 3 microlitros da suspensão de células-tronco mesenquimais em cada narina durante um período de três segundos por entrega da solução, mantendo o camundongo na posição por 30 segundos até que as gotas de amostra desapareçam completamente. Após dois minutos, repita a entrega até três vezes até que todo o volume de células-tronco mesenquimais tenha sido liberado. Em seguida, retorne o mouse à sua gaiola com monitoramento até a decúbito total.