Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 3:25 min. • June 17th, 2025
Comece com uma câmara experimental revestida de elastômero de silicone contendo um músculo de camundongo seguro posicionado sob um microscópio confocal.
O músculo é imerso em uma solução fisiológica contendo inibidores que bloqueiam as contrações musculares.
O coto nervoso marcado com um corante fluorescente de cálcio é posicionado dentro do eletrodo de sucção, que é conectado a um estimulador elétrico.
Na junção neuromuscular, o nervo periférico está conectado ao músculo.
Aplique um estímulo elétrico ao nervo usando o eletrodo. Isso desencadeia um rápido influxo de íons de cálcio que se ligam ao corante de cálcio intracelular.
Ilumine a junção neuromuscular para excitar o corante de cálcio, fazendo com que ele fique fluorescente.
Em seguida, capture imagens de alta resolução para registrar transientes rápidos de cálcio nas terminações nervosas periféricas.
Selecione a região de interesse e meça a intensidade da fluorescência.
Um rápido aumento na intensidade da fluorescência indica influxo de cálcio nas terminações nervosas periféricas, enquanto uma diminuição reflete a depuração do cálcio.
Encha o sistema de perfusão com a solução de Ringer contendo 10 micromolares D-tubocurarina e ligue
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