Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 2:13 min. • June 17th, 2025
Comece com um camundongo anestesiado com um gânglio geniculado exposto cirurgicamente, um aglomerado de neurônios periféricos que processam o paladar.
Esses neurônios expressam GCaMP, um indicador de cálcio que fluoresce após a ligação do cálcio.
Remova qualquer líquido que cubra o gânglio para uma visualização clara.
Coloque o mouse em uma almofada absorvente sob um microscópio e localize o gânglio geniculado usando pontos de referência anatômicos.
Usando um filtro apropriado no escopo de epifluorescência, detecte a fluorescência verde dos neurônios que expressam GCaMP.
Em seguida, insira uma agulha dispensadora conectada ao tubo de entrega do saborizante na boca do mouse e entregue o saborizante.
O saborizante estimula as células receptoras do paladar, liberando ATP, que se liga aos receptores dos neurônios ganglionares, desencadeando o influxo de cálcio.
Esses íons de cálcio se ligam aos GCaMPs, induzindo a emissão de fluorescência.
Alinhe a câmera com o campo de visão do microscópio e sincronize a gravação de vídeo com a entrega de saborizantes para capturar a atividade neuronal em tempo real por meio de alterações de fluorescência.
Para executar o painel de saborizantes, use sucção pa
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