Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 4:27 min. • June 17th, 2025
Comece com um cérebro de Drosophila limpo com glicerol em meios de montagem antifade.
O cérebro contém neurônios medulares dispostos em camadas, que organizam as conexões sinápticas, e colunas, que coordenam os circuitos neurais.
Alguns desses neurônios são marcados com marcadores fluorescentes verdes, contrastando com os axônios fotorreceptores fluorescentes vermelhos.
Posicione o cérebro com o lado ventral para cima. Coloque uma lamínula com pequenos remendos de argila nas laterais para evitar esmagar a amostra de cérebro.
Sob um microscópio, obtenha a pilha de imagens de visualização horizontal, contendo o neurônio marcado em verde.
Remova a lamínula e reposicione o cérebro, com o lado anterior para cima.
Capture uma pilha de imagens da visão frontal do mesmo neurônio.
Usando o software, combine essas imagens, remova o canal fotorreceptor e visualize a imagem 3D do neurônio.
Trace o axônio e depois os dendritos, seguindo cada ramo até sua terminação, para mapear a organização dendrítica nas camadas e colunas da medula.
Para montar o cérebro na orientação horizontal, transfira um cérebro limpo com glicerol para uma gota de 20 microlitros de meio de montagem anti-desbotamento, depositado
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