Visualização de trombos cerebrais de camundongos usando imagens de fluorescência no infravermelho próximo

Comece com um tecido cerebral de camundongo excisado contendo trombos, ou coágulos sanguíneos, nos vasos sanguíneos cerebrais.

Os trombos são marcados com uma sonda fluorescente de infravermelho próximo ou NIRF que se liga covalentemente aos filamentos de fibrina durante a maturação do trombo.

Coloque o tecido cerebral em um gerador de imagens de infravermelho próximo, posicionando a base do cérebro ou o lado ventral voltado para cima para obter imagens do trombo nas principais artérias cerebrais.

Aplique luz infravermelha próxima ao tecido cerebral que excita a sonda NIRF no trombo marcado.

Após a excitação, a sonda emite luz em um comprimento de onda mais longo.

Isso faz com que o trombo fique fluorescente e pareça brilhante contra um fundo escuro, minimizando a interferência dos tecidos circundantes.

Em seguida, inverta o tecido cerebral e visualize o lado dorsal do cérebro para visualizar o trombo nos pequenos vasos sanguíneos corticais.

Isso garante a visualização completa do trombo no tecido cerebral com alto contraste.

Para visualizar o trombo por imagens ex-vivo de infravermelho próximo, coloque o tecido cerebral excisado no gerador de imagens com a base apontando para cima. Obtenha imagens dos tromboêmbolos marcados com fluorescência nas artérias do Círculo de Willis. Em seguida, posicione o tecido com o vértice apontando para cima e visualize os tromboêmbolos corticais.