Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 2:56 min. • August 7th, 2025
Pegue um camundongo anestesiado com os gânglios da raiz dorsal L4 e L5 expostos contendo corpos celulares de neurônios sensoriais.
Carregue uma pipeta de microinjeção com construções de RNA marcadas com fluoróforo que regulam a regeneração do axônio e um corante traçador.
Injete a mistura nos DRGs.
Usando eletrodos de eletroporação, aplique pulsos elétricos aos DRGs.
Isso rompe as membranas dos corpos celulares dos neurônios sensoriais, criando poros que permitem que as construções entrem no citoplasma, facilitando a transfecção.
Suture a incisão e permita que o camundongo se recupere.
Após alguns dias, re-anestesiar e prender o mouse.
Faça uma incisão lateral à linha média à esquerda. Disseque os músculos para expor o nervo ciático.
Esmague o nervo para ferir os axônios dos neurônios sensoriais. Marque o local com um nó de sutura.
Suture a incisão e permita que o camundongo se recupere.
As construções transfectadas têm como alvo mRNAs em corpos celulares de neurônios sensoriais DRG, modulando transitoriamente a produção de proteínas para aumentar a regeneração sensorial do axônio pós-lesão.
Para injeção de DRG, carregue os plasmídeos de DNA ou oligos de RNA na pipeta capilar de vidro. Em se
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