Quantificação de espinhas dendríticas usando imagens de microscopia confocal

Pegue os neurônios piramidais que são transduzidos e imunomarcados para fluorescer em verde.

Adquira imagens dos neurônios usando um microscópio confocal de varredura a laser com configurações ajustadas para garantir a qualidade de imagem ideal.

Abra uma imagem usando um software especializado e use o filtro gaussiano para reduzir o ruído de fundo.

Execute o rastreamento semiautomático de dendritos estimando primeiro o diâmetro do dendrito. Em seguida, selecione o ponto inicial, o caminho e o ponto final do dendrito.

Para segmentação automatizada da coluna, selecione reconstruir o diâmetro do dendrito e defina o limite de volume do dendrito para representar o volume real do dendrito.

Especifique valores para o menor diâmetro da cabeça da lombada e o comprimento máximo da lombada.

Ajuste o limite para pontos que representam espinhos, garantindo sua localização nas cabeças reais dos lombados.

Defina parâmetros para classificar os espinhos com base no comprimento, diâmetro da cabeça e forma.

Gere um modelo 3D do dendrito com espinhos e exporte os dados para análise posterior.

Sob um microscópio confocal, selecione pelo menos 10 neurônios saudáveis por condição com uma morfologia piramidal e u