Terapia gênica baseada em vetores virais para restauração auditiva em um modelo de camundongo

Pegue um filhote de rato anestesiado com perda auditiva geneticamente induzida.

Nessa condição, as células ciliadas do ouvido interno carecem de transportadores de glutamato, impedindo que o glutamato seja empacotado em vesículas e liberado.

Isso interrompe a transmissão de sinais sonoros para o nervo auditivo.

Raspe o mouse atrás da orelha esquerda, desinfete e aplique pomada para os olhos.

Estenda o pescoço e faça uma incisão.

Retraia o tecido adiposo e os músculos para expor o osso temporal.

Perfure a bula timpânica, parte do osso temporal, e alargue a abertura para expor a membrana da janela redonda ou RWM, uma barreira fina para o ouvido interno.

Perfure o RWM e injete o vetor viral adeno-associado que carrega o gene terapêutico.

As partículas virais se difundem e entram nas células ciliadas.

Dentro das células ciliadas, as partículas virais entregam seu material genético ao núcleo, desencadeando a produção do transportador de glutamato.

Isso permite o empacotamento e liberação do glutamato, restaurando a sinalização sonora do nervo auditivo.

Após confirmar a anestesia por pinça do dedo do pé, raspe a região pós-auricular esquerda e desinfete a pele de um camundongo pós-natal do 10º ao