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Comece com um camundongo imunodeficiente injetado com células progenitoras neurais humanas geneticamente modificadas, ou NPCs, em seu cérebro.
Essas células expressam luciferase, uma enzima produtora de luz.
Injete luciferina, o substrato da luciferase, por via intraperitoneal no camundongo.
Anestesie o mouse e, em seguida, aplique lubrificante oftálmico nos olhos para evitar o ressecamento e raspe a cabeça para obter imagens.
Posicione o mouse em decúbito ventral dentro de uma câmara de imagem com condições predefinidas para imagem.
A luciferina circula na corrente sanguínea e entra no tecido cerebral passando pelas células endoteliais, atingindo os NPCs transplantados.
Dentro das células, a luciferina reage com a luciferase e produz luz bioluminescente.
O sistema de imagem captura esses sinais bioluminescentes emitidos pelo local do transplante de NPC.
Esses sinais bioluminescentes confirmam o transplante bem-sucedido dos NPCs humanos para o cérebro do camundongo.
Injete a luciferina por via intraperitoneal e, após cinco minutos, anestesie os animais com um suprimento contínuo de isoflurano. Raspe os animais sedados na região da cabeça usando um barbeador de cabelo convencional. Coloque o animal na câmara de imagem e inicie a imagem 15 minutos após a injeção de luciferina clicando em Adquirir no painel de controle.
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