Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 3:22 min. • June 17th, 2025
Coloque uma placa de Petri contendo um peixe-zebra anestesiado com um tubo inserido em sua boca para fornecer água oxigenada sob a lente objetiva de baixa ampliação do microscópio de três fótons.
O cérebro do peixe-zebra contém neurônios geneticamente modificados que expressam proteínas marcadas com fluorescência para visualização de tecidos profundos durante a imagem.
Ilumine a antena usando uma fonte de luz LED e ajuste os parâmetros de visualização para maior clareza da imagem.
Abaixe a lente objetiva até que o peixe-zebra fique visível, centralizando a cabeça no campo de visão.
Substitua a lente de baixa ampliação por uma objetiva de alta resolução para imagens de três fótons.
Abaixe cuidadosamente a objetiva até que a cabeça fique visível sem contato físico e defina os valores do eixo como zero.
Desligue a fonte de luz LED e feche a cortina escura para minimizar o ruído de fundo.
Defina os parâmetros de imagem e execute imagens de três fótons, onde comprimentos de onda mais longos permitem a excitação de três fótons de tecidos profundos.
Após a excitação, os fluoróforos neuronais emitem fluorescência, permitindo a visualização em tempo real dos neurônios em várias profundidades.
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