Imagem da migração de células tumorais em tecido de glioblastoma usando microscopia confocal de varredura com lapso de tempo

Comece com uma fatia de tecido de glioblastoma obtida de um tumor excisado cirurgicamente.

Mantenha a fatia de tecido em um meio de cultura para apoiar a sobrevivência celular.

As células tumorais dentro da fatia expressam uma proteína fluorescente verde, ou GFP, que facilita a visualização das células tumorais durante a migração celular.

Coloque a placa de cultura contendo as fatias de tecido no stage do microscópio confocal.

Posicione uma incubadora no topo do palco para manter a temperatura do meio.

Selecione uma objetiva e visualize as culturas de fatias ao microscópio.

Os microscópios usam luz laser para excitar as proteínas fluorescentes nas células.

Agora, digitalize a amostra camada por camada para capturar imagens em várias profundidades.

Empilhe as imagens para criar uma representação 3D detalhada das células.

Em seguida, capture imagens da pilha Z em intervalos regulares para rastrear o movimento e a direção das células, permitindo o estudo da migração de células tumorais ao longo do tempo.

Coloque o prato em uma incubadora de microscópio selada de 37 graus, 5% CO₂ de um microscópio confocal. Use uma objetiva aérea de longa distância de trabalho de 10x em conjunto com imagens de