Name: Junho de 2012: Este mês na JOVE (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-06-01T13:30:00.000+00:00
Duration: 5 min 50 s
Description: Explore métodos inovadores de preparação de enxertos de córnea para transplante, desenvolvidos por grupos de pesquisa da Itália e Michigan. Essas técnicas avançadas melhoram os resultados da ceratoplastia e aumentam a disponibilidade de enxertos para pacientes com lesões corneanas.

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<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3709">Hibridização in situ de glândulas salivares, ovários e embriões de mosquitos vetores</a></h2>
Jennifer Juhn1, Anthony A. James2, 1 1Departamento de Biologia Molecular e Bioquímica, Universidade da Califórnia, Irvine, 2Departamento de Microbiologia e Genética Molecular, Universidade da Califórnia, Irvine 
As análises de expressão gênica temporal e espacial têm um papel crucial na genômica funcional. A hibridização de montagem total in situ é útil para determinar a localização de transcritos dentro de tecidos e compartimentos subcelulares. Aqui descrevemos um protocolo de hibridização in situ com modificações para tecidos-alvo específicos em mosquitos.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3763">Estudando o checkpoint mitótico ilustrando o comportamento dinâmico da proteína cinetocoro e o movimento cromossômico em embriões sinciciais vivos de drosófila</a></h2>
Maureen Sinclair1, Jun-Yong Huang2, 1 1Instituto de Biociências Celulares e Moleculares, Universidade de Newcastle, Reino Unido, 2Instituto de Biociências Celulares e Moleculares, Universidade de Newcastle
O cinetócoro é onde o SAC inicia seu sinal monitorando a segregação mitótica das cromátides irmãs. Um método é descrito para visualizar o recrutamento e a renovação de uma das proteínas do cinetócoro e sua coordenação com o movimento cromossômico em embriões de Drosophila usando um sistema confocal de varredura a laser Leica.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3765">Uma técnica simplificada para excisão in situ da córnea e evisceração do tecido retiniano do globo ocular humano</a></h2>
Mohit Parekh1, Stefano Ferrari1, Enzo Di Iorio1, Vanessa Barbaro1, Davide Camposampiero1, Marianthi Karali2, Diego Ponzin1, Gianni Salvalaio3, 1 1Fondazione Banca Degli Occhi del Veneto O.N.L.U.S. , 2Telethon Institute for Genetics & Medicine (T.I.G.E.M.), 3Fondazione Banca Degli Occhi del Veneto, O.N.L.U.S.
O artigo descreve uma técnica simplificada para extirpar córnea e eviscerar tecidos retinianos do globo ocular de doadores cadáveres humanos. A técnica aqui descrita ajudará a extirpar tecidos de boa qualidade para serem usados para fins de transplante, cirúrgicos ou de pesquisa sem danificar outros tecidos do globo ocular.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3813">Diferenciação eficiente de células-tronco embrionárias de camundongos em neurônios motores</a></h2>
Chia-Yen Wu1, Dosh Whye2, 1, Robert W. Mason1, Wenlan Wang1 1Nemours Biomedical Research, Alfred I. duPont Hospital for Children, 2Departamento de Pediatria, Centro Médico da Universidade de Columbia
Desenvolvemos um novo protocolo para melhorar a eficiência da diferenciação in vitro de células-tronco embrionárias de camundongos em neurônios motores. As células ES diferenciadas adquiriram características de neurônios motores, conforme evidenciado pela expressão de marcadores neuronais e de neurônios motores usando técnicas imuno-histoquímicas.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3847">Preparação de tecido doador de córnea para ceratoplastia endotelial</a></h2>
Maria A. Woodward1, Michael Titus2, Kyle Mavin2, Roni M. Shtein1 1Departamento de Oftalmologia, Universidade de Michigan, 2Bancos de Olhos do Centro-Oeste
O transplante endotelial de córnea é uma técnica cirúrgica para o tratamento de doenças da córnea posterior. A dissecção mecânica de microcerátomos para preparar o tecido resulta em enxertos mais finos e simétricos, com menos perda de células endoteliais e melhores resultados. As dissecções podem ser realizadas no banco de olhos antes da cirurgia de transplante de córnea.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3958">Microfluídica endotelizada para estudo de interações microvasculares em doenças hematológicas</a></h2>
David R. Myers1, 2, 3, 4,*, Yumiko Sakurai1, 2, 3, 4,*, Reginald Tran1, 2, 3, 4, Byungwook Ahn1, 2, 3, 4, Elaissa Trybus Hardy1, 2, 3, 4, Robert Mannino1, 2, 3, 4, Ashley Kita1, 2, 3, 4, Michelle Tsai1, 2, 3, 4, Wilbur A. Lam1, 2, 3, 4 1Departamento de Pediatria, Escola de Medicina da Universidade Emory, 2Wallace H. Coulter Departamento de Engenharia Biomédica, Instituto de Tecnologia da Geórgia e Universidade Emory, 3Centro de Câncer Aflac e Serviço de Saúde Infantil de Atlanta, 4Winship Cancer Institute da Emory University * Esses autores contribuíram igualmente
Um método para cultivar uma monocamada de células endoteliais em toda a superfície 3D interna de um dispositivo microfluídico com canais de tamanho microvascular (<30 μm) é descrito. Este modelo de microvasculatura in vitro permite o estudo de interações biofísicas entre células sanguíneas, células endoteliais e fatores solúveis em doenças hematológicas.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3993">Gravação de sinais eletrocorticográficos humanos (ECoG) para pesquisa neurocientífica e mapeamento cortical funcional em tempo real</a></h2>
N. Jeremy Hill1, Disha Gupta2, 1, Peter Brunner2, 1, Aysegul Gunduz2, 1, Matthew A. Adamo3, Anthony Ritaccio2, Gerwin Schalk1, 2, 4, 5, 6, 7 1Wadsworth Center, Departamento de Saúde do Estado de Nova York, 2Departamento de Neurologia, Albany Medical College, 3Departamento de Neurocirurgia, Albany Medical College, 4Departamento de Neurocirurgia, Universidade de Washington, 5Departamento de Biomedicina. Eng., Instituto Politécnico Rensselaer, 6Departamento de Biomedicina. Sci., UNIVERSIDADE ESTADUAL DE NOVA YORK EM ALBANY, 7Departamento de Elec. e Comp. Eng., Universidade do Texas em El Paso 
Apresentamos um método para coletar sinais eletrocorticográficos para fins de pesquisa de humanos que estão passando por monitoramento invasivo de epilepsia. Mostramos como usar a plataforma de software BCI2000 para coleta de dados, processamento de sinais e apresentação de estímulos. Especificamente, demonstramos o SIGFRIED, uma ferramenta baseada em BCI2000 para mapeamento cerebral funcional em tempo real.

Não há conflitos de interesse declarados.

junho de 2012: este mês na jove

June 2012: This Month in JoVE

Em 1905, no que hoje é a República Tcheca, Eduard Zirm realizou a primeira cirurgia de transplante de córnea (ceratoplastia), que restaurou a visão de um paciente cego por lesão na córnea. Hoje, bancos de olhos em todo o mundo preparam, armazenam e distribuem córneas doadas a hospitais para que milhares de ceratoplastias que salvam a visão possam ser realizadas todos os anos. Em junho de 2012, o JoVE está de olho em dois grupos de pesquisa, um da Itália e outro de Michigan, que demonstram dois métodos distintos para a preparação do enxerto de córnea antes do transplante.
Nossos autores da Itália nos mostram sua técnica para extirpar a córnea do globo ocular, que envolve primeiro mergulhá-la em uma série de soluções esterilizantes, preparando-a para manuseio estéril, criando uma incisão na superfície escleral e, finalmente, separando a borda córnea-escleral do globo. Uma vez que a córnea é removida, a densidade e a viabilidade das células endoteliais são verificadas e ela é preparada para armazenamento de longo prazo, período durante o qual o meio é testado periodicamente de forma de alto rendimento com outros enxertos depositados no banco de olhos.
Nas cirurgias de transplante de córnea, enxertos de espessura total são usados em um procedimento chamado ceratoplastia penetrante; no entanto, JoVE aprende que em algumas córneas doentes, apenas a camada endotelial é afetada. Nossos autores da Universidade de Michigan e do Banco de Olhos do Centro-Oeste demonstram o processamento adicional de córneas de doadores com a ceratoplastia endotelial automatizada de remoção de Descemet (DSAEK), um procedimento que envolve o enxerto apenas da camada endotelial da córnea. Este procedimento relativamente recente é possível através do uso de um microcerátomo, um dispositivo que pode cortar com precisão a córnea para que a camada endotelial possa ser separada para transplante. A uniformidade e a qualidade do tecido doador são verificadas por meio de lâmpada de fenda e microscopia especular, e o enxerto é armazenado para cirurgia de transplante de córnea.
Juntos, dois grupos de autores, de diferentes continentes, documentaram as etapas para remover toda a córnea do olho e isolar a camada posterior para ceratoplastia endotelial - um processo que diminui o risco de infecção ou rejeição do enxerto e melhora a capacidade de visão do paciente.
Na JoVE Neuroscience, uma equipe multidisciplinar de médicos e cientistas apresenta novas aplicações de pesquisa da eletrocorticografia (ECoG). O ECoG é um procedimento invasivo que usa eletrodos de tira e grade colocados diretamente no cérebro para localizar focos de convulsão em pacientes com epilepsia. Este procedimento também pode ser usado para mapear regiões corticais que precisam ser poupadas durante a cirurgia ressectiva. O mapeamento cortical é realizado monitorando se a estimulação de um determinado eletrodo resulta na interrupção do movimento ou da fala. Os pacientes são normalmente submetidos a monitoramento intracraniano para localizar focos de convulsão por cerca de uma semana, e essa duração oferece uma janela de oportunidade única para os pesquisadores estudarem o cérebro humano em ação com o ECoG, que tem melhores propriedades sinal-ruído e menos suscetibilidade a artefatos de gravação do que o eletroencefalografia não invasivo (EEG).
Depois de determinar a atividade basal em repouso, nossos autores registram a atividade cerebral na faixa de alta frequência gama, durante tarefas cognitivas ou motoras simples. Em seguida, esses pesquisadores demonstram como usar o sistema de software SIGFRIED para realizar um mapeamento funcional rápido e em tempo real com base em sinais ECoG, que são analisados posteriormente para fornecer informações sobre as regiões cerebrais associadas a tarefas específicas.
Em Bioengenharia, JoVE encontra uma equipe de cientistas que mostram que a microvasculatura pode ser recriada aproximadamente em um chip. Este "chip" é na verdade um dispositivo com canais microfluídicos que são revestidos com células endoteliais. A fotolitografia SU-8 é usada para gravar o padrão do canal em um wafer de silício, que atua como um molde para o PDMS. Uma vez que o dispositivo tenha sido fabricado, ele é semeado com células endoteliais, que são cultivadas nos canais. Graças à transparência do PDMS, as células podem ser visualizadas por microscopia. Este modelo in vitro da microvasculatura fornece um microambiente controlado que pode ser usado para estudar processos hemodinâmicos normais, bem como em doenças hematológicas.
Este breve resumo é um mero vislumbre de alguns dos conteúdos da JoVE para o mês de junho. Investigações adicionais podem levar a métodos de hibridização in situ de tecido e embrião de mosquito adulto, visualizando mitose em drosófilas e diferenciando células-tronco embrionárias em neurônios motores. Fique ligado.

Junho de 2012: Este mês na JOVE

Back in 1905, in what is now the Czech Republic, Eduard Zirm performed the first corneal transplantation surgery (keratoplasty), which restored vision to ...

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Explore métodos inovadores de preparação de enxertos de córnea para transplante, desenvolvidos por grupos de pesquisa da Itália e Michigan. Essas técnicas avançadas melhoram os resultados da ceratoplastia e aumentam a disponibilidade de enxertos para pacientes com lesões corneanas.

Junho de 2012: Este mês na JOVE (Vídeo) | JoVE Journal

Wendy Chao

Aaron Kolski-Andreaco

Junho de 2012: Este mês na JOVE

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