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DOI: 10.3791/50197-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Nós demonstramos uma técnica minimamente invasiva referido como eletroporação zona neonatal subventricular. A técnica consiste em injectar o DNA de plasmídeo nos ventrículos laterais de bebés recém-nascidos e na aplicação de corrente eléctrica para fornecer e manipular geneticamente as células estaminais neurais
O objetivo deste procedimento é marcar e manipular geneticamente os constituintes moleculares das células-tronco neurais da zona subventricular. Isso é feito inserindo primeiro uma pipeta de vidro carregada com DNA no ventrículo lateral de um P zero P. O segundo passo é expelir o DNA para o líquido cefalorraquidiano do ventrículo lateral. A próxima corrente é aplicada ao P. Isso permite a transferência de DNA para células-tronco neurais que revestem os ventrículos laterais.
Em última análise, uma combinação de técnicas moleculares, incluindo imuno-histoquímica, biologia molecular, microscopia e eletrofisiologia, é usada para visualizar mudanças no destino, proliferação, migração e maturação de células-tronco neurológicas da zona subventricular. A eletroporação da zona subventricular neonatal pode ajudar a responder a questões-chave no campo da neurogênese, como quais vias moleculares são responsáveis por regular a proliferação, diferenciação, migração e maturação de células-tronco neuronais e sua progênie. A principal vantagem dessa técnica sobre os métodos existentes, como camundongos transgênicos, é que ela permite a marcação rápida e robusta de células-tronco de neurônios da SVZ de maneira eficiente e econômica.
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