Enzimas de Restrição

Enzimas de restrição ou endonucleases reconhecem e cortam DNA em uma sequência específica. Essas enzimas ocorrem naturalmente em bactérias como uma defesa contra bacteriófagos – vírus que infectam bactérias. Enzimas de restrição bacteriana cortam o DNA de bacteriófago invasor, deixando o DNA genômico bacteriano ileso devido à adição de grupos de metila.

Este vídeo explica os princípios básicos das enzimas de restrição, incluindo: como as enzimas de restrição são nomeadas e os tipos de sites de reconhecimento e saliências que existem. Também é fornecido um procedimento generalizado passo a passo para como configurar um digestor de restrição, incluindo os componentes necessários, a ordem em que a mistura deve ser montada e a temperatura e o tempo típicos de incubação. A importância de inativar enzimas de restrição para prevenir a atividade estelar é mencionada. Dicas para a realização de múltiplas enzimas digestões e uso de controles em reações de digestão também são fornecidas.