Name: Precauções de segurança e Procedimentos Operacionais em um (A) BSL-4 laboratoriais: 4. Procedimentos Médicos de Imagem (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-10-03T11:30:00.000+00:00
Duration: 9 min 36 s
Description: Aprenda os procedimentos de segurança para imagem médica em laboratório de biossegurança nível 4. Este método demonstra como avaliar a progressão de doenças infecciosas em animais de forma não invasiva.

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O conteúdo desta publicação não reflete necessariamente as opiniões ou políticas do Departamento de Saúde e Serviços Humanos dos EUA (DHHS) ou das instituições e empresas afiliadas aos autores. Este trabalho foi financiado em parte pelo contrato principal do Battelle Memorial Institute com o Instituto Nacional de Alergia e Doenças Infecciosas dos EUA (NIAID) sob o Contrato No. HHSN272200700016I. M.R.H., K.J., D.P., L.B. e J.W. realizaram este trabalho como funcionários do Battelle Memorial Institute. Os subcontratados do Battelle Memorial Institute que realizaram este trabalho são: R.B., funcionário da Charles River Laboratories - Insourcing Solutions; L.K. e M.R.L., funcionários da MEDRelief Staffing Inc.; M.G.L. como funcionário do Lovelace Respiratory Research Institute, Inc.; e J.H.K. como funcionário da Tunnell Government Services, Inc.

Este protocolo segue as seguintes orientações de cuidados de animais. Os animais foram alojados em uma instalação credenciada pela Associação de Avaliação e Acreditação do Laboratório de Animal Care International. Todos os procedimentos experimentais foram aprovados pelo Instituto Nacional de Alergia e Doenças Infecciosas, da Divisão de Investigação Clínica, Animal Care e do Comitê Use e estavam em conformidade com os regulamentos Animal Welfare Act, política de Serviço de Saúde Pública, e o Guia para o Cuidado e Uso de Animais de laboratório recomendações. 1. Prepare CT Scanner (em &quot;Cold Side&quot;) <ol><li> Condicionar o Tubo de Raios-X <ol><li> Verifique se nenhum membro da equipe está na sala de digitalização e mesa o assunto está vazio. </li><li> Executar o procedimento tubo condicionado de acordo com as especificações do fabricante do scanner. </li></ol></li><li> Executar a calibração Air <ol><li> Certifique-se de que nenhum objeto está no campo de digitalização. </li&gt; <li> Execute o procedimento de calibragem de ar de acordo com as especificações do fabricante do scanner. Em muitas plataformas, esta calibração é automática ou semi-automática. </li></ol></li><li> Execute Qualidade de digitalização de controle (em &quot;Hot Side&quot;) <ol><li> Complete os procedimentos de entrada de laboratório NBA-4 terno (descritos em detalhe em referência 5) com a adição de uma etapa extra. Se os procedimentos envolvem a exposição aos materiais radioactivos, clipe de um dosímetro para os scrubs sob o fato de protecção. Por sua vez, o dosímetro a cada 2 meses para o cálculo da exposição à radiação. </li><li> Coloque a cabeça eo corpo fantasma CT, que é feito fora do ar, água e Teflon, no suporte apropriado na mesa de digitalização. </li></ol></li><li> Execute Qualidade de digitalização de controle (em &quot;Cold Side&quot;) <ol><li> A partir do lado frio, avançar o fantasma para o centro do furo 6. </li><li> Adquirir uma varredura usando parâmetros de controle laboratorial padronizado de qualidade (QC) para ensure o scanner está dentro das especificações do fabricante. </li><li> Execute QC análise computadorizada de imagens para calcular os desvios médios e padrão de intensidade de sinal dentro de regiões de interesse centrado sobre cada tipo de material (ar, água ou Teflon) de acordo com o protocolo do fabricante. </li><li> Notificar os funcionários CM que o tomógrafo está pronto para uso. </li><li> Verifique as informações dos animais (número de identificação, peso, data de nascimento) com a equipe CM. </li></ol></li><li> Registre Informação Assunto para o Banco de Dados do Paciente. <ol><li> No console do tomógrafo (no &quot;lado frio&quot;), acesse Sistema de Informação de Radiologia do scanner (RIS). Verifique se o RIS é preenchida com os detalhes do cronograma de digitalização. </li><li> Selecione o assunto e dados demográficos, como número de identificação, idade, data de nascimento e data do exame atual; em seguida, o tipo de exame deve preencher automaticamente. </li><li> inserir manualmente peso assunto. </li><li> Escolha correta suorientação bject no CT pórtico (por exemplo, de cabeça, pés em primeiro lugar, de bruços, em decúbito dorsal). </li></ol></li></ol> 2. Prepare Áreas de Trabalho no terno do Laboratório NBA-4 <ol><li> Prepare o II Biossegurança Gabinete Class (BSC) ou Downdraft mesa na sala Procedimento Animal. Ligue BSC (ou Downdraft Table) pelo menos 10 min antes do uso. <ol><li> solução desinfectante (acetato de cloreto de amónio dimetil benzil amónio cloreto de dimetil-benzil-N-alquil-, N-alquilo) Limpar e desinfectar superfícies interiores do BSC ou a superfície de topo da mesa de corrente descendente com um desinfectante aprovado, tal como 5% de amónio quaternário dupla. Pulverizar as superfícies interiores do BSC ou a superfície de topo da mesa de corrente descendente e limpar superfícies secas após 10 min de tempo de contacto. Spray e limpe as superfícies com 70% de etanol para remover desinfectante residual. </li><li> equipamentos lugar e suprimentos necessários na tabela de BSC ou downdraft, incluindo a caixa indução da anestesia e animais luvas de manipulação. </li></<html> ol&gt; </li><li> Prepare o CT Scanner Bed. <ol><li> Defina-se o dispositivo de retenção de animais na cama CT. </li><li> Set-up O monitor de sinais vitais para detectar a frequência cardíaca e saturação de oxigênio. Se sessão de digitalização é mais do que 10 min, temperatura monitor. </li></ol></li><li> Prepare o aparelho de anestesia. <ol><li> Verificar o volume isoflurano no vaporizador e adicionar mais isoflurano, se necessário. </li><li> Realizar um teste de vazamento através da pressurização do circuito respiratório anestésico com oxigénio, verificando para o gás escapou, e inspecionar visualmente a máquina de anestesia para vazamentos 1. <ol><li> Se for detectado um vazamento, determinar a fonte, corrija o problema e executar um teste de vazamento de acompanhamento para verificar as correções foram devidamente implementadas. </li></ol></li><li> Pesar o recipiente de eliminação descartável que capta gás anestésico resíduos. Se o recipiente é ≥50 g sobre o peso inicial do recipiente, substitua canister 7. </li></ol></li></ol>title &quot;&gt; 3. Transporte de Animal de quarto animal Procedimento e Preparação de Anestesia Indução no CT quarto Scanner (em&quot; Hot Side &quot;) <ol><li> Transfira a gaiola de habitação a cobaia de um dos Rodent Dadas Quartos Adjacentes para a Suíte de imagem para o BSC Classe II. <ol><li> Verifique se o ID animal. </li><li> Remova o cartão de gaiola e manter com o animal. </li></ol></li><li> Abra a tampa para a gaiola e don luvas de couro de proteção de animais sobre as luvas terno de pressão positiva. Levante com cuidado a cobaia, colocar animais na caixa de indução da anestesia, e cobrir a caixa com a tampa. </li><li> Remova a caixa de indução anestésica contendo o animal do BSC Classe II e colocá-lo em um carrinho de transporte. </li><li> Usando o carrinho, levar o animal ao quarto do varredor do CT. </li><li> Na sala scanner CT, ligue imediatamente o recipiente de eliminação e aparelho de anestesia para a caixa de indução. Ligue o gás oxigénio para a caixa de indução e definir o vaporizador para DelivER 4% de isoflurano para indução inicial da anestesia 8. </li><li> Monitorar o animal durante a indução da anestesia para a profundidade adequada da anestesia (por exemplo, não responde a estímulos externos, tônus muscular, respiratório estável e taxas de coração) 8. </li><li> Desligue a anestesia para a caixa de indução quando a cobaia está totalmente anestesiado. </li></ol> 4. Organizar Assunto on Imaging Bed no CT Scanner (no &quot;lado quente&quot;) <ol><li> Remova a anestesiado Cobaia da Caixa de Indução e colocar no Imagiologia Bed. <ol><li> Coloque a cobaia na almofada participação numa posição de bruços. </li><li> Aplicar pomada oftálmica em ambos os olhos para proteger o epitélio corneano de secar. </li></ol></li><li> Administrar Manutenção isoflurano Anestesia. <ol><li> Coloque o cone do nariz na cobaia e transformar em gás para entregar 1 L / min de oxigênio para o nariz cone 8. </li><li> Definir o vaporizador para entregar 2-3%isoflurano para a cobaia através do cone do nariz. </li><li> Uma vez que o tema atinja o plano desejado de anestesia (nenhum movimento, ~ 60 respirações por minuto), reduza o ajuste para entregar 1,0-1,5% de isoflurano para a manutenção da anestesia vaporizador. </li><li> Monitorar os sinais vitais, incluindo a temperatura corporal, freqüência cardíaca e freqüência respiratória. Se a freqüência respiratória começa a acelerar ou desacelerar, aumentar ou diminuir a porcentagem de isoflurano, respectivamente 9. </li></ol></li><li> Proporcionar uma fonte de calor adicional para manter a temperatura do corpo da cobaia entre 37 e 39 ° C, se necessário, dependendo do comprimento esperado de aquisição de dados e de profundidade de anestesia mantida 8,9. </li><li> Garantir uma cobertura plástica sobre a parte superior da almofada de retenção. </li><li> Avançar cama de imagens para dentro do tubo de contenção. </li></ol> 5. Definir o campo Imagem do Vista <ol><li> Ative o sistema de laser (equipe de imagens) sobre o &quot;lado frio&quot; do sc CTanner espaço para posicionar a cobaia para a digitalização CT. Use a tabela &quot;em&quot; botões e &quot;out&quot; para cobrir a anatomia de interesse sob a mira a laser. </li><li> Para definir o campo de visão, use o botão de laser para definir o ponto de partida sobre a anatomia de interesse. </li><li> Contato na equipe CM em &quot;lado quente&quot; para colocar um escudo de chumbo, entre si, o scanner CT. </li></ol> 6. adquirir imagens <ol><li> Adquirir varredura levantamento para colocação fatia de imagens do estudo CT de acordo com o protocolo do fabricante. </li><li> Prescrever colocação fatia de imagens do estudo CT em imagens da pesquisa. </li><li> Coordenar com pessoal &quot;do lado quente&quot; se a injeção de contraste é para ser usado. </li><li> Adquirir varredura estudo de acordo com o protocolo do fabricante. </li><li> Reconstruir imagens de CT no console do scanner de acordo com o protocolo do fabricante. </li><li> Enviar imagens para um PACS. Realizar mais qualitativa e quantitative analisa a partir deste sistema de arquivo de acordo com o protocolo do fabricante. </li></ol> Recuperação 7. Pós-scan <ol><li> Transferir cobaia do scanner a uma gaiola microisolator limpo com comida e guloseimas. </li><li> Usando o carrinho, transportar a gaiola com animais de volta à sua área de habitação. </li><li> Monitorar o animal até que esteja totalmente recuperado da anestesia. </li><li> Uma vez totalmente recuperado, volte a gaiola para o High Efficiency Particulate Air (HEPA) filtrado por prateleiras ventiladas. </li></ol> 8. Desinfecção do Scanner Bay e Equipamentos <ol><li> Desinfectar área da baía do scanner (por exemplo, superfícies que estavam em contato direto com o animal, scanner, chão da sala scanner, puxadores das portas) com uma solução de amônio 5% dupla quaternário para um tempo de contacto de 10 min. </li><li> Enxaguar as superfícies com uma solução de etanol a 70% após uma exposição de 10 min a uma solução de amónio quaternário dupla. </li><li> Limpe itens que não podem ser pulverizadas diretamentecom uma solução dupla quaternário de amônio (equipamentos eletrônicos sensíveis) com um pano dual-quaternário-saturado de amónio seguido por um pano saturado de etanol. </li></ol>

<ol><li>Jahrling, P. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+NIAID+Integrated+Research+Facility+at+Frederick%2C+Maryland%3A+a+unique+international+resource+to+facilitate+medical+countermeasure+development+for+BSL-4+pathogens%5BTitle%5D)+AND+%22Pathog+Dis%22%5BJournal%5D)">The NIAID Integrated Research Facility at Frederick, Maryland: a unique international resource to facilitate medical countermeasure development for BSL-4 pathogens.</a> Pathog Dis. , (2014).</li>
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<li>Bohannon, J. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Safety+precautions+and+operating+procedures+in+an+%28A%29BSL-4+laboratory%3A+3.+Aerobiology%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Safety precautions and operating procedures in an (A)BSL-4 laboratory: 3. Aerobiology.</a> J Vis Exp. , (2016).</li>
</ol>

Os autores não têm nada a divulgar.

Artigos anteriores desta série têm enfatizado a extensa formação, atenção aos detalhes, os procedimentos de segurança e controles de engenharia adicionais necessários para trabalhar com segurança em um 12,13 máxima laboratório de contenção. Realizar o trabalho com segurança é a maior prioridade nesses laboratórios. Esta filosofia é ainda mais importante quando se trabalha com animais vivos, devido a riscos adicionais, tais como o potencial de animais infectados para infligir mordidas ou arranhões ou para gera...

A missão do Instituto Nacional de Alergia e Doenças Infecciosas (NIAID) Facilidade Integrado de Pesquisa em Fort Detrick em Frederick MD (IRF-Frederick) é a realização de pesquisa de doenças infecciosas emergentes para compreender os processos de doença clínicos que se correlacionam com a gravidade da induzida por microbiano doença. O IRF-Frederick tem uma capacidade única para realizar imagiologia médica em modelos animais de patógenos de alta-consequência num laboratório 1 NBA-4. Os métodos de imagem disponíveis para os investigadores incluem: tomografia computadorizada (TC), ressonância magnética (MRI), tomografia por emissão de positrões (PET), de fóton único tomografia computadorizada (SPECT), ultra-som, raios-X e fluoroscopia. Pesquisadores usam recursos de imagem disponíveis para monitorar a progressão da doença e avaliar a eficácia das intervenções, tais como tratamento de drogas e de vacinação, em estudos longitudinais. As modalidades de imagem no IRF-Frederick foram especificamenteprojetado para manter os principais componentes do equipamento fora da alta contenção 2,3 e acessível para manutenção e reparação. Este projeto separa a suíte de imagem em (contendo agente patogénico) &quot;quente&quot; e &quot;frio lados.&quot; Para conseguir esta separação, os tubos foram construídos especialmente concebidos para alargar o espaço de alta contenção com os orifícios de cada modalidade de imagiologia (Figura 1). Além de proporcionar contenção biológica, estes tubos proteger o equipamento de imagem a partir de gases e químicos utilizados para descontaminar o laboratório de alta contenção. cientistas e tecnólogos de imagem operar os scanners do &quot;lado frio&quot;, enquanto Medicina Comparativa (CM) punho equipe e monitorar animais no &quot;lado quente&quot;. Uma vez que a equipe CM deve trabalhar em estreita colaboração com cientistas de imagem para coordenar estas experiências, esta separação pode resultar em desafios de comunicação. Depois de avaliar as opções disponíveis, a equipe CM estavam foraequipado com peças de orelha Bluetooth que transmitem ondas de rádio ultra-alta frequência de curto comprimento de onda para os telefones usados ​​para chamar o pessoal de imagem fora do confinamento. Devido à concepção da instalação, os pontos de acesso sem fios tiveram que ser instalados em cada um dos quartos para ultrapassar a interferência do sinal provocada por as camadas de cimento e do aço entre o &quot;quente&quot; e &quot;frio&quot; lados. Assim, a comunicação entre a equipe CM vestindo ternos de pressão positiva ruidosos e funcionários de imagem fora de alta contenção agora é confiável. Câmeras também foram instalados no lado quente dos quartos de imagem para imagem pessoal para ver a atividade no &quot;lado quente&quot;. Com as câmeras, a equipe de imagem pode orientar técnicos CM com posicionamento animal ou quaisquer alterações de última hora para o protocolo de imagem. Todo o trabalho na NBA-4 laboratório terno IRF-Frederick requer pessoal a usar de pressão positiva encapsular ternos 4. Vestindo estes ternos reduz a mobilidade, e a pesada tardex luvas ligados ao terno além de até três camadas adicionais de luvas compromete destreza. O resultado é que os procedimentos demoram mais tempo para ser concluído e tarefas que exigem habilidade motora fina são muito mais difíceis. Como o nível de biossegurança aumenta, manejo dos animais e manipulações tornam-se mais difícil e demorado, especialmente com pequenos animais. Procedimentos em um laboratório NBA-4 pode levar até 2-3 vezes mais do que um laboratório NBA-2. O objetivo deste artigo é demonstrar visualmente os desafios associados com modelos de imagens de animais em um ambiente NBA-4 utilizando CT procedimento de digitalização de uma cobaia como um exemplo.

<table><tbody><tr><td>Micro-Chem Plus</td><td>National Chemical Laboratories</td><td>255</td><td></td></tr><tr><td>CT</td><td>scanner Philips Healthcare</td><td></td><td></td></tr><tr><td>CT phantom</td><td>Philips Healthcare</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Isovue-300 (reagente de contraste CT)</td><td>Bracco Diagnostics</td><td>NDC 0270-1315-30</td><td></td></tr><tr><td>Rack ventilado</td><td>Produtos</td><td></td><td></td>de laboratório</tr><tr><td>Gaiola micro-isoladora</td><td>Produtos</td><td></td><td></td>de laboratório</tr><tr><td>Armário de biossegurança</td> Máquina de anestesia <td>Nuaire</td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td>SurgiVet</td><td>WWV9000</td><td></td></tr><tr><td>Caixa de indução de anestesia</td><td>VetEquip</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Máscara de anestesia</td><td>Henry Schein</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Isoflurano</td><td>Henry Schein</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Recipiente</td> <td>de eliminação de gases residuaisFisher</td><td>F / AIR</td><td></td></tr><tr><td>Almofada</td><td></td><td></td><td></td>de retenção</tr><tr><td>Pomada oftálmica</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Monitor de sinais vitais</td><td>Bionet</td><td>BM3Vet</td><td></td></tr><tr><td>Celular</td><td>Spectralink</td><td>8440</td><td></td></tr><tr><td>Fone de ouvido Blue Tooth Pontos</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td>de acesso sem fio</td></tr><tr><td>Sperian Honeywell</td><td>Safety Products</td><td>BSL 4-2</td><td></td></tr><tr><td>Luvas de terno externo (látex, Ansell Canners and Handlers)</td><td>Fisher</td><td>19-019-601</td><td></td></tr><tr><td>Luvas de terno externo (nitrilo/borracha, MAPA)</td><td>Fisher</td><td>2MYU1</td><td></td></tr><tr><td>Scrubs</td><td>Cintas</td><td>60975/60976</td><td></td></tr><tr><td>Meias Cintas</td><td></td><td>944</td><td></td></tr><tr><td>Fita adesiva</td><td>Pack-N-Tape</td><td></td><td></td>51131069695</tr><tr><td>Toalhas</td><td>Cintas</td><td>2720</td><td></td></tr><tr><td>Lubrificante com zíper</td><td>Amazon</td><td>B000GKBEJA</td><td></td></tr></tbody></table>

precauções de segurança e procedimentos operacionais em um (a) bsl-4 laboratoriais: 4. procedimentos médicos de imagem

Safety Precautions and Operating Procedures in an (A)BSL-4 Laboratory: 4. Medical Imaging Procedures

Imagens médicas usando modelos animais para doenças humanas têm sido utilizadas há décadas; no entanto, até recentemente, imagens médicas de doenças induzidas por patógenos de alta consequência não eram possíveis. Em 2014, os Institutos Nacionais de Saúde, Instituto Nacional de Alergia e Doenças Infecciosas, Centro de Pesquisa Integrada em Fort Detrick abriram uma instalação de Nível 4 de Biossegurança Animal (ABSL-4) para avaliar o curso clínico e a patologia de doenças infecciosas em animais infectados experimentalmente. Várias modalidades de imagem, incluindo tomografia computadorizada (TC), ressonância magnética, tomografia por emissão de pósitrons e tomografia computadorizada por emissão de fóton único, estão disponíveis para os pesquisadores para essas avaliações. O foco deste artigo é descrever o fluxo de trabalho para obter com segurança uma imagem de TC de uma cobaia viva em uma instalação ABSL-4. Esses procedimentos incluem manuseio de animais, anestesia e preparação e monitoramento do animal até a recuperação da sedação. Também discutiremos a preparação do equipamento de imagem, a realização de verificações de qualidade, os métodos de comunicação do "lado quente" (contendo patógenos) para o "lado frio" e a movimentação do animal da sala de espera para a sala de imagem.

O cumprimento rigoroso de todos os procedimentos de segurança e procedimentos operacionais padrão para manuseio dos animais é essencial para trabalhar com segurança em um laboratório NBA-4. Transferência de animais infectados dentro da caixa de indução a partir dos animais quarto procedimento para a suite de imagem a minimizar o risco de contaminação dos corredores comuns. Seguindo os procedimentos necessários, não há infecções adquiridas em laboratório ou contaminação cruzada de indivíd...

Aqui, apresentamos uma visão geral dos procedimentos de preparação e manuseio de animais necessários para realizar com segurança imagens médicas em um laboratório de nível 4 de biossegurança animal. A tomografia computadorizada de uma cobaia simulada infectada ilustra esses procedimentos que podem ser usados para avaliar a doença causada por um patógeno de alta consequência.

Precauções de segurança e Procedimentos Operacionais em um (A) BSL-4 laboratoriais: 4. Procedimentos Médicos de Imagem

Medical imaging using animal models for human diseases has been utilized for decades; however, until recently, medical imaging of diseases induced by ...

O objetivo geral deste procedimento de imagem é demonstrar os procedimentos de segurança necessários para realizar a obtenção de imagens médicas de animais em uma instalação de nível de biossegurança animal 4. Por meio da aquisição de imagens no ambiente de nível de biossegurança animal 4, a progressão da doença é avaliada de forma não invasiva e biomarcadores são identificados, auxiliando nas possíveis avaliações terapêuticas e de vacinas. Como as salas de imagem são divididas em lados quente e frio, animais infectados são submetidos à imagem com segurança no lado quente, enquanto a maior parte do equipamento de imagem permanece do lado de fora, no lado frio, facilitando a manutenção.Nosso objetivo é demonstrar que podemos obter imagens desses modelos animais de doenças virais fatais de maneira segura e abordar as limitações de se trabalhar em tal ambiente. O responsável por demonstrar os procedimentos com animais será Russ Byrum, gerente do laboratório animal da instalação de pesquisa integrada. Nosso tecnólogo de imagem, Chris Bartos, trabalha em conjunto com a equipe de medicina comparativa para coordenar o posicionamento do animal no escâner e para adquirir as imagens.Os procedimentos envolvendo animais foram aprovados pelo Comitê de Cuidado e Uso de Animais e pelo Comitê Institucional de Biossegurança. Para preparar o scanner de tomografia computadorizada, verifique se nenhum funcionário está nos lados quente ou frio da sala de varredura e se a mesa do sujeito está vazia. Certifique-se de que um objeto representando a densidade da cabeça e do corpo de um sujeito, denominado fantasma, composto de ar, água e teflon, esteja posicionado no suporte apropriado sobre a mesa de varredura, no lado quente.Pelo lado frio, verifique se o fantasma está adequadamente fixado à cama. Avance o fantasma até o centro do orifício. Adquira uma varredura do fantasma, utilizando parâmetros padronizados de controle de qualidade do laboratório para garantir que o scanner esteja dentro das especificações do fabricante.Informe a equipe de medicina comparativa que o tomógrafo computadorizado, ou scanner de TC, está pronto para uso. Ligue a mesa de exaustão no ambiente de procedimentos com animais pelo menos dez minutos antes do uso. Limpe e desinfete as superfícies da mesa de exaustão, utilizando um desinfetante aprovado, como solução de desinfetante de amônio quaternário duplo a 5%.Pulverize as superfícies internas e limpe-as com pano seco após 10 minutos de tempo de contato; em seguida, pulverize e limpe as superfícies com etanol 70% para remover o desinfetante residual. Coloque no banco de exaustão os equipamentos e materiais necessários, incluindo a caixa de indução anestésica e as luvas para manipulação dos animais. Monte o dispositivo de contenção do animal na mesa do scanner de tomografia computadorizada e, em seguida, configure o monitor de sinais vitais.Verifique o volume de isoflurano no vaporizador e adicione mais isoflurano, se necessário. Inspeccione visualmente a máquina de anestesia em busca de vazamentos e, se necessário, corrija qualquer problema que cause um vazamento. Pese o cartucho de coleta que capta o gás anestésico residual.Transfira a gaiola que contém o porquinho-da-índia de um dos quartos de contenção de roedores adjacentes à sala de imagem para a mesa com fluxo descendente. Verifique o número de identificação do animal na etiqueta da gaiola. Abra a tampa da gaiola e coloque luvas de proteção de couro sobre as luvas do traje de pressão positiva.Levante suavemente o porquinho-da-índia. Coloque o animal na caixa de indução anestésica e cubra a caixa com a tampa. Remova as luvas de manipulação de animais e as luvas do jaleco e limpe-as com solução desinfetante a 5% de amônio quaternário duplo.Remova a caixa de indução de anestesia contendo o animal e a gaiola da mesa com fluxo descendente e coloque-as em um carrinho de transporte. Utilizando o carrinho, leve o animal até a sala de tomografia computadorizada. Na sala do scanner de TC, conecte imediatamente o canister de exaustão e a máquina de anestesia à caixa de indução.Após iniciar a anestesia conforme indicado no protocolo textual, no lado quente da sala do scanner de TC, monitore o animal durante a indução anestésica para verificar a profundidade adequada da anestesia, verificando se o animal não responde a estímulos externos e avaliando o tônus muscular. Retire o porquinho-da-índia anestesiado da caixa de indução e coloque-o sobre o suporte acolchoado em posição prona sobre a mesa de imagem. Para manutenção adicional da anestesia, coloque o cone nasal sobre o porquinho-da-índia e ligue o gás para fornecer oxigênio a um litro por minuto.Administre isoflurano conforme indicado no protocolo textual. Verifique a estabilidade das taxas respiratória e cardíaca. Desligue a anestesia na caixa de indução quando o porquinho-da-índia estiver completamente anestesiado.Aplicar pomada oftálmica em ambos os olhos para proteger o epitélio corneano da dessecação. Ativar o sistema a laser no lado frio da sala do scanner de TC para posicionar o porquinho-da-índia para a varredura de TC. Utilizar os botões de entrada e saída da mesa para cobrir a anatomia de interesse sob as miras a laser.Para definir o campo de visão, use o botão do laser para definir o ponto inicial sobre a anatomia de interesse. Entre em contato com a equipe de medicina comparativa no lado quente para colocar um escudo de chumbo entre eles e o scanner de tomografia computadorizada. Adquira uma varredura de levantamento para o posicionamento dos cortes nas imagens do estudo de TC, conforme o protocolo do fabricante.Prescreva o posicionamento do corte para as imagens do estudo de TC nas imagens de reconhecimento. Coordene com a equipe do lado quente se for utilizada injeção de contraste. Adquira a varredura do estudo de acordo com o protocolo do fabricante e, em seguida, reconstrua as imagens de tomografia computadorizada no console do scanner, também de acordo com o protocolo do fabricante.Envie as imagens para um sistema de arquivamento e comunicação de imagens. Quando necessário, realize análises qualitativas e quantitativas adicionais nesses dados armazenados no sistema de arquivamento. Transfira o porquinho-da-índia da maca do scanner para uma gaiola microisoladora com alimento na sala do scanner de TC.Limpe as luvas de nitrila após manipular o animal. Utilizando o carrinho, transporte a gaiola de volta para a área de alojamento na sala de procedimentos com animais. Monitore o animal até que esteja completamente recuperado da anestesia antes de devolver a gaiola aos armários ventilados com filtro HEPA.Desinfete tanto a mesa de fluxo descendente na sala de procedimentos com animais quanto a área da câmara do escâner com uma solução a 5% de amônio quaternário duplo. Limpe as superfícies com uma solução a 70% de etanol após 10 minutos de exposição à solução de amônio quaternário duplo. Limpe itens como equipamentos eletrônicos sensíveis, por exemplo o monitor e a máquina de anestesia, que não podem ser borrifados diretamente, com um pano saturado com amônio quaternário duplo, seguido por um pano saturado com etanol.O rigoroso cumprimento de todos os procedimentos de segurança e procedimentos operacionais padrão para o manejo de animais é essencial para trabalhar com segurança em um laboratório ABSL4. A transferência de animais infectados dentro da caixa de indução da sala de procedimentos animais para a sala de imagem minimiza o risco de contaminação dos corredores comuns. A implementação de sistemas de comunicação que envolvem telefones Bluetooth com fones de ouvido para a equipe de imagem no lado frio entrar em contato com a equipe de medicina comparativa no lado quente, bem como a comunicação visual, reduz o potencial de equívocos entre as equipes separadas.Ao seguir os procedimentos adequados, nenhuma infecção adquirida em laboratório ou contaminação cruzada de animais foi registrada durante a realização de pesquisas com nível de biossegurança animal 4 no IRF Frederic. Patógenos virais ABSL4 podem induzir patologias relacionadas aos pulmões, e a tomografia computadorizada (TC) é uma ferramenta valiosa para monitorar a progressão da doença em modelos animais de infecção. As imagens de TC são criadas a partir da absorção da radiação de raios X pelos tecidos.Na TC, quanto maior a densidade do objeto imageado, como o osso, mais brilhante aparece o objeto. Tecidos orgânicos densos, como o coração e o fígado, tendem a ter intensidade intermediária, enquanto tecidos cheios de ar, como os pulmões saudáveis, aparecem pretos. A TC adquire múltiplas radiografias em uma visão de 360 graus que é reconstruída em uma imagem tridimensional do corpo.Uma vez dominada, essa técnica pode ser realizada em aproximadamente 30 minutos, se for executada corretamente. Ao seguir procedimentos semelhantes, outras modalidades de imagem, como PET, SPECT e MRI, podem ser utilizadas para responder perguntas adicionais sobre a patogênese da doença e, talvez, até mesmo para o imageamento do próprio vírus. Após assistir a este vídeo, você deverá ter uma boa compreensão da complexidade do procedimento e dos recursos necessários para realizar imageamento médico em animais de laboratório em uma instalação de biossegurança animal nível 4.

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